Weefselpreparatie technieken
Lichtmicroscopie en elektronenmicroscopie
Probleem
Indien men een orgaan zal isoleren, kan men niet zien wat erin zit. Bij een long zien we namelijk
uitwendig niet het volledige buizensysteem. Het is juist dit deel dat belangrijk is en dat men wil
onderzoeken.
We zien dat we dunne plakjes nodig hebben en dat het type microscoop belangrijk is om de dikte te
bepalen. Men zal rekening moeten houden met microscoop dus doorlaten van licht of van
elektronen.
o LM: coupe van 30 µm -> dunne preparaten
o EM: coupe van 60 nm -> ultradunne preparaten
Verder is het belangrijk de morfologie te behouden aangezien het net dit is dat men wil visualiseren;
perfect bewaarde cellen en weefsels. Dit kan men oplossen door fixatie!
Chemische fixatie
= stoppen van biochemische processen en vergroting van stabiliteit in het weefsel. Dit is toxisch voor
micro-organismen. Op deze manier kunnen de micro-organismen het weefsel niet aantasten.
Fixatie zal snel gebeuren na isolatie om zo goed mogelijk te bewaren. Dit zal men doen door middel
van cross-linking van eiwitten in de cel.
HCHO is het product dan men zal toevoegen om zo cross links te veroorzaken. Bij dit proces zal water
vrijkomen. Op deze manier wordt het weefsel beter bewaard in een geheel.
Als aldehyde fixatieven zien we:
o LM: formaldehyde of formol -> trager en diep in het weefsel
o EM: glutaaraldehyde -> sneller fixeren
Het moet o snel mogelijk gebeuren op verschillende manieren:
o Immersie: onderdompelen in een bad met fixatief. Dit kan met kleine blokjes want
vanbinnen moet men ook fixeren
o Perfusie: via de bloedbaan om zo fixatief overal te brengen. Men zal met een buffer het
bloed wegspoelen en dan fixatief in de baan sturen.
Na fixeren moet het fixatief weg want dit kan interfereren.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller UABMW2000. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.19. You're not tied to anything after your purchase.