Dit is een volledige samenvatting van de cursus. Hoofdstuk 1 & 2 is niet te kennen voor het theoretisch examen dus zit niet in mijn samenvatting. Ook zijn de zaken die enkel te kennen waren voor labo niet vermeld in de samenvatting. Deze zaken zijn dus ook niet te kennen voor het theoretische exame...
3.1 ISO-methoden & klassieke cultuurmethoden
Gestandaardiseerde methoden (ISO) erkend als referentie officiële controles
Gebaseerd op klassieke cultuurmethoden meestal steunt op gebruik selectieve
differentiërende media voor groeien, isoleren & tellen doelwitorganisme
3.1.1 Klassieke cultuurmethode (kweekmethode)
Detectie berust op vermogen van m.o om zich onder geschikte omstandigheden te
vermenigvuldigen tot aantallen waarbij waarneming mogelijk is.
4 opeenvolgende stappen:
1) Vooraanrijking op niet-selectief/half-selectief medium herstel van “gestresseerde”
m.o teweegbrengen
2) Aanrijking in selectief medium competitieve flora wordt geïnhibeerd & er is groei
3) Isolatie (detectie) op selectief differentiërend medium
4) Opzuivering verdachte kolonie & bevestigende testen uitvoeren
Duurt 1 tot 4 dagen
Voordeel: - goedkope methode
Nadeel: - vraagt veel tijd
- grote volumes media
3.2 Alternatieve (snelle) methoden
Vervangt stap 3 & 4 klassieke methode
Snel refereren naar kortere tijd tot detectie & automatisatie
Kan industrie helpen voor nieuwe manieren met betrouwbare resultaten en
voedselveiligheid te garanderen
,3.2.1 Chromogene voedingsbodems
Aantonen van enzymatische activiteit =
veelgebruikt identificatiemiddel
bacterie op agarplaat met substraat reactie
zichtbaar doordat kolonies en/of
voedingsbodems verkleuren
chromogene voedingsbodems zitten
chromogene of fluorogene substraten
organisme zal chromogeen of fluorogeen
afsplitsen (=kleurverandering of bij fluorogeen,
fluorescentie)
Meestal sandwich ELISA = specifieke antilichamen gecoat op cupje staal, met
hoeveelheid antigen van m.o, toegevoegd en bindt met elkaar antilichaam (enzym-
gelabeld) wordt specifiek tegen antigen toegevoegd vervolgens substraat toevoegen
(wordt omgezet door enzym) verkregen signaal is maat voor de hoeveelheid
antigen aanwezig is
VIDAS (=geautomatiseerd systeem) 45-120 min
3.2.2.2 Agglutinatie test
, Gebaseerd op specifieke interactie tussen antilichamen en antigenen
Maar op stap 4 (bevestigende test) : m.o zal rol van antigen hebben
Aanwezig? = antilichaam dat is toegevoegd op inert partikel reageren met antigen
ontstaan samenklontering (agglutinatie) door cross-linking
A. Serotypering
Eventueel vervolg stap 4
Bepalen antigenische kenmerken kiem
aanwezigheid: O-antigen op celwand / H-antigen op flagellen
3.2.3 Moleculaire methoden
gebaseerd op genetisch materiaal (DNA/RNA)
2 enkelstrengige DNA moleculen hybridiseren door baseparen
PCR (plymerase chain reaction of polemyrase kettingreactie)
mogelijkheid grote hoeveelheid aan te maken van klein stukje DNA
DNA polymerase word gebruikt want is in staat om DNA streng te kopiëren
Target dat gekopieerd word is gespecifieerd
door keuze primers (= korte oligonuleotiden waarvan
sequentie complementair is met einde targetregio)
PCR omvat 3 stappen: 1) DNA wordt gedenatureerd.
Strengen scheiden door verhitting tot
95°C
2) temperatuur verlaagd 65°C
toevoeging primers (één die
past aan begin en één aan
einde)
3) temperatuur verhoogt 72°C toevoeging enzym polymerase en
groot aantal nucleotiden hierdoor complementaire streng
geproduceerd en nieuw dbss DNA
Real-time PCR (qPCR) variant waarbij ook online kwantificatie gebeurt
PCR 30-90 min in beslag stap 1 & 2 nog steeds nodig
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller kyaraderoeck. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $6.00. You're not tied to anything after your purchase.
