Class notes
Notities Voet Thierry Moleculaire Genetica Hoofdstuk 6
- Course
- Institution
- Book
Notities Voet Thierry Moleculaire Genetica Hoofdstuk 6 Alle hoofdstukken staan te koop als bundel
[Show more]
Connected book
Book Title:
Author(s):
- Edition:
- ISBN:
- Edition:
More summaries for
-
Lecture Notes
-
samenvatting gene and genome
-
Genes & Genomes samenvatting 2019-2020 (BMW20605)
Seller
Follow
LindeVanAelst
Reviews received
Content preview
HOOFDSTUK 6 Core DNA technologies: amplifying DNA, nucleic acid hybridization, andDNA sequencing
6.1 Cloning DNA in bacterial cells
Stukje DNA uit DNA populatie amplificeren / cloneren. Dit is selectieve amplificatie.
Meerdere stukken of ganse genoom amplificiren, is niet selectieve amplificatie.
Cell based cloning: DNA polymerase van de cel zelf gebruiken.
Cell free cloning: in vitro polymerase gebruiken.
,Cell based cloning:
DNA uit bloed isoleren → opdelen in stukjes van werkbare grootte (Wanneer we DNA uit
bloedcellen isoleren zijn het zeer lange niet werkbare fragmenten. Je moet kleine werkbare
stukjes krijgen) → werkbare DNA fragmenten in vector ligeren → mengsel van DNA fragmenten
in vector, mixen met cellen bvb bacteriecellen of gisten, blootstellen aan elektrische puls
waardoor membraan van bacterie even opengaat → selectieve transformatie, er wordt ofwel 1
ofwel geen DNA molecule in de cel opgenomen → cellen die elk één DNA fragment bevatten,
afzonderen → van die cellen meerdere meerdere kopijen maken door celdeling → van die
celpopulatie DNA afzonderen.
,Naast een geschikte gastheercel is ook een replicon en dus vector nodig. We maken vaak
gebruik van extra chromosomale replicons, dat betekent dat vector onafhankelijk van
gastheergenoom gaat kunnen repliceren. Wanneer we een stukje naakt DNA in bacterie zouden
stoppen, kan het niet repliceren. Vector nodig waarop origine van DNA recplicatie zit. Humaan
DNA fragment dat in vector is gestoken (=recombinant DNA), gaat na transformatie dus na
opname in bacteriecel, oiv origine van DNA replicatie, kunnen repliceren.
Wanneer de bacteriecel deelt, krijgen we heel veel cellen die elk verschillende kopijen van het
DNA franmgent bevatten.
, Vectoren zijn vaak gemodificeerde plasmiden.
Circulaire plasmiden kunnen beter getransformeerd worden dan de lineaire plasmiden.
Bacteriofagen zijn de virussen van de bacterien.
Ook bacteriofagen kunnen zowel extrachromosomaal als geintegreerd in het
gastheerchromosoom bestaan.
Gistartificiele chromosomen met centromeer, ars en telomeer.
Cosmide vectoren dragen de cos sequentie.
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller LindeVanAelst. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.25. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
78252 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now