Summary
Samenvatting Celbiologie Immunologie Experimenteren (CIE)
- Course
- Institution
Samenvatting Celbiologie Immunologie Experimenteren (CIE)
[Show more]
Seller
Follow
jillspaander
Reviews received
Content preview
Hoorcollege 1: FlowcytometrieImmunologisch onderzoek :
Identificeren van cellen
Karakteriseren van cellen
Isoleren van cellen : functionele testen uitvoeren
Het zichtbaar maken van antigenen in/op cellen met behulp van antilichamen = CIE
Hoe onderscheiden we de cellen ? Alle 10 basisspellers hebben een eigen CD marker ( epitopen dat
cell types identificeren, ook in de fases van differentiatie )
= Immunochemie / immunofluorescentie
Antilichamen : geproduceerd door B cellen in reactie op specifiek antigenen, reageren specifiek met
één epitoop ( sleutelslot)
- Gebruik van antilichamen om verschillende cellen te herkennen.
- Antilichaam met fluorescent label ! (aanstralen bij bepaalde golflengte en uitstralen bij
andere golflengte)
Als antilichaam bindt aan de marker ontstaat er een kleur. Niet dezelfde fluorescente kleur = ander
antilichaam.
Fluorescentie microscoop :
Voordeel
- Bepalen van locatie van cellen/antigenen
Nadelen
- Kost veel tijd
- Moeilijk te kwantificeren (subjectief)
Flowcytometrie :
- Cellen in suspensie worden gelabeled met antilichamen met een
fluorescent label.
- Cellen worden geanalyseerd m.b.v detector = snelle, individuele
analyse van vele cellen = verschillende detectoren
De eerste plot die je maakt : FSC/SSC
Forwards scatter = celgrootte
Side scatter = granulariteit
, Altijd ongekleurd sample/ isotype meenemen om te bepalen waar negatieve liggen!
Er moet meer FITC worden afgetrokken van PE signaal: want er zou geen PE signaal moeten zijn :
geen antilichamen die kunnen binden… (Dus -FITC moet omhoog)
FACS = fluorescence-activated cell sorting : op basis van een apparaat fluorescentie en alle soorten in
buisjes sorteren.
Hoorcollege 2 : ELISA : Enzyme-linked immunosorbent assay
Toepassingen :
Humane geneeskunde en diergeneeskunde
- Diagnostiek
- Therapie
- Research
Agricultuur
- Plantenhormonen
- Micro-organismen, virussen
Voedselveiligheid
- Micro-organismen, virussen, toxinen
Milieu
- Pesticiden en hun metabolieten (vb atrazine)
- Milieuverontreinigende stoffen (vb dioxines, PBB’s)
Ook hormonen kunnen gemeten worden met ELISA.
ELISA bindt aan alles wat lichaamsvreemd is.
Voordelen ELISA :
- Gemakkelijke toepasbaarheid/ eenvoudige techniek
- Veelzijdig: heel veel verschillende soorten molekulen kunnen gemeten worden (virusdeeltjes,
eiwitten, hormonen, etc.)
- Kwantitatief: hoeveelheden kunnen bepaald worden
- Gevoelig, sensitief: kleine hoeveelheden al detecteerbaar
- Specifiek, reproduceerbaar: kleine foutmarge
ELISA = speciaal soort plastic, alles ( antigen) blijft eraan plakken. (coating)
Alles wordt in overmaat toegevoegd.
Blocking buffer voorkomen van aspecifieke bindingen = lege plekjes opvullen
Algemene stappen in een ELISA :
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller jillspaander. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $6.40. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
56326 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now