Summary
Samenvatting college 14 GKA
- Course
- Institution
Samenvatting van college 14 van het vak gentherapie, kanker en AIDS. Deel 2 van de cursus over AIDS.
[Show more]
1 review
By: rikvandellen1 • 3 year ago
Seller
Follow
lotjeb
Reviews received
Content preview
Hoorcollege 14https://xerte.uu.nl/play.php?template_id=1343#page1 (HIV-eiwitten oefenen)
Diagnose van HIV
• ELISA
• Western blot
Monitoring
• CD4-telling ® FACS (fluorescense activated cell sorting)
• Viral load ® RT-PCR
De mate van HIV wordt ondergedeeld in de Fiebig stages van I-VI, afhankelijk van hoe ernstig het is.
ELISA ® enzyme-linked immunosorbent assay
• Gebruikt als HIV-test
• Een plastic wellplaat is gecoat met HIV of HIV-eiwitten
• Hierin wordt het patiënten serum gepipeteerd
• Het serum heeft verschillende antilichamen en andere eiwitten
o Als de patiënt HIV geïnfecteerd is zal hij antilichamen hebben tegen HIV of HIV-
eiwitten en deze zullen binden aan de plaat
• Dan wordt een conjugaat toegevoegd
o Antilichaam met een enzym gekoppeld, dat bindt aan het menselijke antilichaam
• Voeg vervolgens substraat voor het enzym toe
• Wanneer het conjugaat gebonden is aan het menselijke antilichaam geeft het kleur af of
wordt het fluorescent
Western blot
• Gebruikt als HIV-test
• Je runt een gel met eiwitten van HIV en deze
breng je over op een drager zodat de eiwitten vast
komen te zitten (block)
• Dan incubeer je het membraan met serum van de
patiënt en was je
• Dan incubeer je met een HRP-gelabeld tweede
antilichaam dat bindt aan het patiënt antilichaam
en was je opnieuw
• Incubeer de blot dan met chemiluminescent HRP-
substraat om bandjes te kunnen zien
• Western blot is specifieker maar duurt langer
o Wordt gebruikt als ondersteuning als er
twijfel is over positiviteit bij ELISA
, FACS ® fluorescence activated cell sorting
• Gebruikt voor CD4 telling
• Je hebt een sample met cellen die je met flow cytometry onderzoekt
o Je hebt het sample al behandeld met een
fluorescent antilichaam dat bindt aan CD4
• Het sample wordt verneveld en aangestraald met licht
o Wanneer het gebonden fluorescente antilichaam
aangestraald wordt geeft het een fluorescent
signaal af dat waarneembaar is op de computer
o Dit kan met verschillende kleuren
o Kan kwantitatief of kwalitatief
RT-PCR ® reverse transcriptase polymerase chain reaction
• HIV RNA zit in het bloed
o Kan makkelijk geïsoleerd worden door fenol
extractie
• Wordt gebruikt als een surrogaat marker om de viral load te bepalen
o Goede maat voor inschatting van de ernst van HIV
HIV-therapie verbeteren
• Geen vaccin? ® dan maar een therapie ontwikkelen
• Tot 1993 had je alleen maar AZT (azidothymidine) en behandeling voor opportunistische
infecties
o Voor AZT werden patiënten na 1,5 jaar resistent door mutaties in RT
• In 1993 werden drie klasse medicijnen ontwikkeld/ontdekt
• Ideale HIV-medicijnen
o Medicijnen die binding aan CD4 T-cellen blokkeert
o RT-inhibitors
o Integratie inhibitors
o Medicijnen die HIV proteases remmen
• Doel van de medicijnen ® latente periode verlengen, dus de replicatie verminderen
• NRTIs ® nucleotide reverse transcriptase inhibitors
o AZT ® azidothymidine
• nNRTIs ® non-nucleotide reverse transcriptase inhibitors
o Ontwikkeld rond 1993
https://player.vimeo.com/video/260291607 ® handig filmpje, samenvatting HIV-infectie en
replicatie
NRTI-werkingsmechanisme
• Werking van alle nucleotide analogen
• AZT of iedere nucleotide analoog wordt ingebouwd maar
doordat deze analogen een OH-groep missen aan het 3e
koolstof wordt de keten niet verder verlengd, en wordt de
synthese geblokkeerd
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller lotjeb. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $3.21. You're not tied to anything after your purchase.
Can Stuvia be trusted?
4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)
50843 documents were sold in the last 30 days
Founded in 2010, the go-to place to buy study notes for 14 years now