100% satisfaction guarantee Immediately available after payment Both online and in PDF No strings attached
logo-home
Previously searched by you
Previously searched by you
logo
Verzameling van alle mogelijke examenvragen van het vak scheiding en zuivering van biomoleculen (BMW: behaald resultaat 18/20) £13.71   Add to cart
Quickly navigate to
Preview
  2.  
  3. Universiteit Antwerpen (UA)
  4.  
  5. Biomedische Wetenschappen
  6.  
  7. Scheiding En Zuivering Van Biomoleculen

Exam (elaborations)

Verzameling van alle mogelijke examenvragen van het vak scheiding en zuivering van biomoleculen (BMW: behaald resultaat 18/20)
 76 views  4 purchases
  • Module
  • Scheiding En Zuivering Van Biomoleculen
  • Institution
  • Universiteit Antwerpen (UA)

Verzameling van alle mogelijke examenvragen van het vak scheiding en zuivering van biomoleculen (BMW: behaald resultaat 18/20): Hierin staat alles in wat de prof Xaveer Van Ostade heeft aangeven dat je moet kennen voor het examen. Leer deze oude examenvragen (die vaak terugkomen) en je bent er vlot...

[Show more]

Preview 2 out of 14  pages

Document information

  • November 3, 2021
  • 14
  • 2022/2023
  • Exam (elaborations)
  • Questions & answers

Subjects

  • cursus
  • oplossing
  • examenvragen
  • xaveer van ostade
  • biomedische wetenschappen
  • scheiding en zuivering
  • zuivering
  • scheiding
  • samenvatting
  • scheiding en zuivering van biomoleculen

Written for

  • Universiteit Antwerpen (UA)
  • Biomedische Wetenschappen
  • Scheiding En Zuivering Van Biomoleculen
All documents for this subject (32)

Seller

avatar-seller
lemmeslodders

Reviews received

Content preview

Examenvragen scheiding
1. Beschrijf het concept van de theoretisch platen. Illustreer waar mogelijk. Hoe berekenen
we deze?

Het concept van theoretische platen is gebaseerd op het aantal evenwichten tussen de mobiele en
stationaire fase die plaats kunnen vinden gedurende het scheidingsproces. Hoe meer evenwichten er
zullen plaatsvinden, hoe beter het scheidingsproces, dus hoe efficiënter de kolom. Echter de kwaliteit
van de kolom kan verschillen naargelang de condities. Daarom is N = L/H met L de lengte van de
kolom en H de hoogte-equivalent van 1 theoretische plaat. Dus daar waar de N bruikbaar is om de
veranderde efficiëntie van een bepaalde kolom onder verschillende condities te meten Verschillende
factoren kunnen H beïnvloeden, zoals de bv. snelheid waarmee de stof door de kolom loopt, de
viscositeit van het solvent, de korrelgrootte van de matrix… H wordt uitgedrukt in µm.

Het aantal theoretische platen berekenen, gaat als volgt. Men kan de plaathoogte H berekenen die
op zijn beurt gecorreleerd is met de piekbreedte van de eluerende stof. De piekbreedte is namelijk
door diffusie normaal verdeeld over een bepaald volume V e gedurende een bepaalde tijd.




2. Teken een Van Deemter curve. Aan welke vergelijking beantwoordt deze? Bespreek de
verschillende termen uit de vergelijking en duid ze aan op de figuur.

B
H= A + +CF met A de bijdrage van de Eddy diffusie, B/F de bijdrage van
F
de longitudinale diffusie en CF de term voor de massa-overdracht. Deze
vergelijking beschrijft een rechthoekige hyperbool met een minimale
B
plaathoogte voor een optimaal debiet FO =
√ C
en Hmin = A+2 √ BC .

Uit de vorm van de Van Deemter plot kan informatie worden bekomen
omtrent de verschillende effecten die bijdragen tot de bandverbreding. De parameters A, B en C zijn
verschillend voor elke kolom en worden experimenteel bepaald uit de grafische uitzetting van de Van
Deemter vergelijking. A is de doorsnede van de asymptoot met de Y-as, C is de richtingscoëfficiënt
van de asymptoot en B kan berekend worden uit de waarde voor H min of FO.

De niet-uniforme stroming (Eddy diffusie) van de mobiele fase. Door kanaalvorming kan de
stroomsnelheid en afgelegde afstand sterk variëren doorheen de kolom. De verbreding door Eddy
diffusie is evenredig met de lengte van de kolom en de diameter van de deeltjes (σ²= AL).

, De longitudinale diffusie van de opgeloste stof. Opgeloste stoffen verblijven eenzelfde tijd in de
mobiele fase. In deze fase ontstaat bandverbreding door diffusie. Deze is evenredig met de lengte
van de kolom en omgekeerd evenredig met de lineaire snelheid v (debiet F) van de mobiele fase (σ² =
(B/F)L).

De effecten van massa-overdracht. De chromatograferende stof wordt continue geadsorbeerd en
gedesorbeerd van de stationaire fase. Bij desorptie van de matrix komt de stof soms terecht aan de
achterkant van de chromatograferende zone. Dit gebeurt omdat niet alle partikels tegelijk
desorberen. Het effect is evenredig met de lengte van de kolom en de snelheid v van de eluerende
stof (σ² = (CF)L).

3. Beschouw het volgend chromatogram. Welke chromatografieën
zouden zijn gebruikt wanneer:
- 1 = laag MW en 6 = hoog MW, beide zelfde lading
- 1 = kation en 6 = anion
- 1 = hoog MW en 6 = laag MW
- 1 = weinig hydrofoob en 6 = meer hydrofoob onder natieve
omstandigheden

 Omgekeerde fase chromatografie
 Anion uitwisselingschromatografie (omgekeerde fase niet uit te sluiten)
 Gelfiltratie (omgekeerde fase niet uit te sluiten)
 Hydrofobe interactie chromatografie




4. Is het mogelijk door chromatografie om 1 eiwit uit een mengsel op te zuiveren? Licht toe in
een paar zinnen.

Ja, door affiniteitschromatografie, bv. “Immobilized Metal Affinity Chromatography” of IMAC.
Wanneer het eiwit door genetische manipulatie is voorzien van een N-terminale thrombine
herkenningsplaats gevolgd door een histidine-rijk etiket (His-tag). Dit eiwit kan via de His-tag selectief
binden op korrels (stationaire fase) welke een gecheleerd metaal bevatten (bv. Ni 2+, Co2+). Na
incubatie wordt de rest van het mengsel weggewassen en het gebonden eiwit kan geëlueerd worden
van de korrels door behandeling van de korrels met thrombine zodat het eiwit vrijkomt en de
thrombine herkenningsplaats + de His-tag achterblijf op de korrels.

5. Welke polymeren worden veel gebruikt voor gelelektroforese? Kan je er een tekenen?

Agarose, polyacrylamide (zie apart blad).

6. Waarin vooral onderscheidt dunnelaag elektroforese zich van dunnelaag chromatografie?

Door de manier waarop de macromoleculen in beweging worden gebracht. Bij dunnelaag
chromatografie is dit capillaire kracht van het solvent, bij dunnelaag elektroforese is dit een
elektrisch veld waarbij de geladen macromoleculen aangetrokken worden naar één van de twee
elektrodes.

The benefits of buying summaries with Stuvia:

Guaranteed quality through customer reviews

Guaranteed quality through customer reviews

Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.

Quick and easy check-out

Quick and easy check-out

You can quickly pay through credit card for the summaries. There is no membership needed.

Focus on what matters

Focus on what matters

Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!

Frequently asked questions

What do I get when I buy this document?

You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.

Satisfaction guarantee: how does it work?

Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.

Who am I buying these notes from?

Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller lemmeslodders. Stuvia facilitates payment to the seller.

Will I be stuck with a subscription?

No, you only buy these notes for £13.71. You're not tied to anything after your purchase.

Can Stuvia be trusted?

4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)

67474 documents were sold in the last 30 days

Founded in 2010, the go-to place to buy revision notes and other study material for 14 years now

Start selling
£13.71  4x  sold
  • (0)
  Add to cart