Gevoeligheidsbepalingen
Antibiogram
- Bactericide (=dodend) vermogen
- Dosering van antibiotica in serum
Bactericide = doden de bacterie versus bacteriostatisch = remmen de groei van bacteriën
Gevoeligheid van bacteriën
Biologische gevoeligheid: (MIC)
Duidt aan welke de kleinste concentratie van het antibioticum is die de bacterie kan beletten te
groeien: MINIMALE INHIBERENDE CONCENTRATIE (MIC)
Dilutiemethode
Vloeibaar milieu
- Macrodilutie (in buisjes)
1. Men laat een bacterie-ioculum groeien (37°C/ 18-24 uur) in vloeibare VB (tube) met verschillende
concentraties (duploverdunningen) van het antibioticum → concentratie van antibioticum
uitgedrukt in µg/mL (mg/L)
2. Na incubatie neemt men als MIC: de laagste concentratie van het antibioticum waarbij de groei van
de bacterie volledig geremd wordt (bv. 1 µg/mL)
3. Wanneer men de culturen die geen macroscopische groei vertonen, overent op een vaste
voedingsbodem en opnieuw incubeert op 37°C / 18-24 uur kan men de MBC bepalen
MBC= minimale bactericiede concentratie (bv. 4 µg/mL)
- Microdilutie (in microtiterplaat)
Hetzelfde principe alleen de MIC-bepaling gebeurt in microtiterplaten i.p.v. in buizen
(semi)-automatiseerbaar
, vast milieu
Vereenvoudigde plaatdilutie methode:
- Mueller Hinton agar wordt gesteriliseerd
- na afkoeling tot 56°C worden antibiotica toegevoegd
in verschillende concentraties
waarom na 56°C? anders is de antibiotica al kapot maar hij
moet nog altijd vloeibaar zijn om te kunnen gieten
- na goed mengen worden de voedingsbodems
uitgegoten in petriplaten
- de voedingsbodems worden geënt door radiale
streepentingen, ofwel met een automatische
multipoint inoculator met 25 stempels onder de vorm
van entstippen
Vereenvoudigde plaatdilutie methode:
- als inoculum suspendeert men één kolonie in 0,5 ml TSB die men 3-4
uur incubeert op 37°C, hiervan ent men 1 entlus of 1 druppel
- na incubatie 37°C, 18-24 uur worden de platen afgelezen
MIC= laagste concentratie van het antibioticum waarbij geen groei optreedt
Diffusiemethode
Diskmethode
- Kirby-Bauer methode (papieren schijfjes)
o een bacterie-inoculum worden geënt op een Mueller Hinton agar.
o ronde papieren schijfjes vloeipapier gedrenkt in een antibioticumoplossing
worden op de agar aangebracht
o incubatie 37°C/ 18-24 uur
- Neo-Sensitabs methode (ROSCO tabletjes)
o idem: tabletjes i.p.v. papieren schijfjes
Principe:
- bacterie begint te groeien en vormt zichtbare kolonies
- antibioticum zal oplossen en diffunderen in de agar, hierdoor zal de concentratie
van het antibioticum afnemen naarmate het zich verder verspreidt in de agar
→ gevolg: cirkelvormige inhibitiezones
- de inhibitiediameter is omgekeerd evenredig met het logaritme van de MIC
- voor elk schijfje met een gekende lading antibioticum kan men een regressielijn
bekomen indien verschillende bacterie-stammen worden getest
- de regressielijn is de beste benadering van de relatie tussen MIC en de inhibitiezone, maar is
slechts semikwantitatief
S = gevoelig
I = intermediair
R = resistent
Heteroresistentie = als er kolonies zich in de inhibitiezones bevinden
The benefits of buying summaries with Stuvia:
Guaranteed quality through customer reviews
Stuvia customers have reviewed more than 700,000 summaries. This how you know that you are buying the best documents.
Quick and easy check-out
You can quickly pay through credit card or Stuvia-credit for the summaries. There is no membership needed.
Focus on what matters
Your fellow students write the study notes themselves, which is why the documents are always reliable and up-to-date. This ensures you quickly get to the core!
Frequently asked questions
What do I get when I buy this document?
You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.
Satisfaction guarantee: how does it work?
Our satisfaction guarantee ensures that you always find a study document that suits you well. You fill out a form, and our customer service team takes care of the rest.
Who am I buying these notes from?
Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller emmadw. Stuvia facilitates payment to the seller.
Will I be stuck with a subscription?
No, you only buy these notes for $7.02. You're not tied to anything after your purchase.