Sumario Tejido Sanguíneo y Tinciones Giemsa y Diff-Quik (Romanowsky)
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Course
Histología para la salud
Institution
Universidad De Oriente
Este documento es un informe donde podrá encontrar información sobre los tipos de tejido sanguíneo, su morfología, y los tipos de coloraciones que son derivaciones de los coloraciones de tipo Romanowsky, con enfoque en la coloración de Giemsa y la Diff-Quik, dando información sobre sus fundam...
En el fascinante mundo de la hematología, la tinción es una herramienta indispensable que
revela los secretos celulares ocultos en la sangre, como anomalías morfológicas que suelen ser uno
de los signos más tempranos de numerosas enfermedades como anemias, linfomas, parásitos, entre
otras, mediante técnicas fáciles de realizar y de bajo costo.
La sangre desempeña un papel importante en el sustento de nuestro cuerpo. Ésta es
considerada un tejido conectivo especializado que tiene como función principal transportar oxígeno a
todas las células del organismo, compuesta por una sustancia intercelular llamada plasma y
componentes formes como células sanguíneas. Entre ellas se encuentran los eritrocitos, leucocitos y
plaquetas.
Para estudiar la morfología de estas células sanguíneas, es necesario realizar extendidos de
sangre o frotis, una técnica de estudio clínico importante que nos permite visualizar las anomalías y
dar un diagnóstico sólido en relación a las enfermedades que se puedan producir. Para ello, se
utilizan coloraciones de tipo Romanowsky constituidas por un colorante ácido como eosina, uno
básico como el azul de metileno y derivados de éste último por oxidación: los azures A y B
denominados colorantes metacromáticos.
Estas coloraciones nos permiten la identificación y caracterización precisa de los elementos
formes de la sangre, lo cual nos permite hacer una diferenciación entre las células existentes como lo
son los hematíes, leucocitos y plaquetas.
De esta manera podemos apreciar células llamadas leucocitos (células inmunitarias) que a su
vez se clasifican en dos categorías: los granulocitos, que presentan granulaciones en su citoplasma y
se dividen en neutrófilos (no tienen afinidad con ningún colorante), basófilos (tienen afinidad por el
colorante metacromático adquiriendo un color púrpura-negruzco) y eosinófilos (tienen afinidad por el
colorante ácido adquiriendo un color rojo-anaranjado); y los agranulocitos, que son células con
escasas granulaciones específicas en su citoplasma y se clasifican en linfocitos y monocitos.
En este informe, exploraremos a detalle las tinciones utilizadas en los frotis sanguíneos obtenidos
en la realización de la práctica de laboratorio que corresponde al tema n°19 que trata sobre el tejido
sanguíneo, con enfoque en los fundamentos de éstas coloraciones así como sus ventajas y
desventajas. Además, abordaremos en detalle los diferentes tipos de tejido sanguíneo que fueron
observados en los extendidos de sangre, identificándolos y dándoles una descripción morfológica.
, DESARROLLO
1. Tinciones usadas en el laboratorio.
Las técnicas de tinción usadas en el laboratorio fueron Giemsa y Diff-Quik, ambas catalogadas
como derivaciones del método de tinción Romanowsky.
La tinción de Giemsa fue desarrollada por el bacteriólogo y químico Gustav Giemsa. Es una
tinción diferencial de ácido nucleico utilizada comúnmente en frotis de sangre para el diagnóstico de
parásitos como la malaria. Esta técnica resulta útil para la observación con mayor exactitud de las
alteraciones en el número, proporción y morfología de las células sanguíneas.
La tinción de Diff-Quik se considera una técnica de tinción rápida y de fácil uso para la
evaluación, comúnmente, de frotis de sangre. Es una modificación de la tinción Wright-Giemsa
patentada en el año 1970 por la empresa química Harleco y el cual es comercializado bajo diferentes
nombres.
2. Fundamentos sobre las técnicas de tinción.
Como sabemos, la mayoría de los métodos de tinción existentes se basan en los principios de
Romanowsky, pero con modificaciones propias tanto en el uso de soluciones y tiempo de realización.
En 1891 Malachowski y Romanowsky desarrollaron de manera independiente técnicas haciendo
uso de una mezcla de eosina y un producto oxidado de azul de metileno, lo cual produjo un color
púrpura particular. Para que ocurriese eso se establecieron dos requisitos: un colorante catiónico
como el Azure B responsable del color púrpura del núcleo y el azul del citoplasma; y un colorante
aniónico como es el caso de la Eosina Y, responsable del color rojizo de los eritrocitos. Posterior a
esto, se introdujo el uso de alcohol metílico como disolvente y fijador antes de la tinción ya que los
colorantes eran inestables; Gustav Giemsa en 1902 mejoró esta técnica mediante el uso de glicerina
junto con metanol.
La tinción de Giemsa tiene muchos usos, tanto en el campo de la citogenética como en el
histopatológico. La tinción se puede combinar con otras como es el caso de la tinción de Wright
formando la coloración Wright-Giemsa (la cual aumenta el brillo del color púrpura-rojizo de los
gránulos citoplasmáticos), tiñe de manera diferencial las células humanas y bacterianas de color
púrpura y rosa, respectivamente, y suele usarse para el estudio de adherencia de patógenos a las
células humanas como Plasmodium que causa la malaria. Debido a que Giemsa vendió los derechos
para producir su tinte, desde mucho antes de la primera guerra mundial se ha comercializado,
originalmente desde Alemania, en presentación de polvo para preparar.
A diferencia de Romanowsky quien usó solamente derivaciones oxidativas del azul de metileno,
Giemsa optó por una combinación de azul de metileno y azure B (combinación conocida por él como
Azure II). El pH del tinte es crítico y se debe mantener entre 6.7 – 6.9, para ello se induce solución
buffer.
Es una tinción clásica para frotis sanguíneos y muestras de médula ósea. Los eritrocitos se tiñen
de rosa-rojizo, las plaquetas se tiñen de un rosa pálido, el citoplasma de los linfocitos de un azul cielo,
el citoplasma de los monocitos de un azul pálido y la cromatina nuclear de los leucocitos se tiñe de un
color magenta.
En cambio, la tinción comercial Diff-Quik es una modificación secreta de la tinción de Wright-
Giemsa, con cambios en el tiempo de realización y simplificación en forma de un kit con 3 soluciones:
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