1.TÉCNICAS DE ESTUDIO CITOLÓGICO
La citología clínica o citopatología es una disciplina que forma parte de la anatomía
patológica; esta, se basa en el examen morfológico de las células con fines diagnósticos
Según cómo se obtendrá el material celular se puede clasificar la citología en:
● Citología exfoliativa
● Citología CL
● Citología PAAF
● Impronta
2. TÉCNICAS DE PROCESAMIENTO, TINCIÓN Y DIAGNÓSTICO
2.1PROCESAMIENTO
Mediante el procesado de una muestra citológica se puede realizar extendidos citológicos
para la posterior tinción
La triple toma no tiene un procesamiento posterior a la recogida, por el contrario, la citología
en medio liquido se procesa de manera automatizada antes de teñirla, para ello se
necesitan aparatos cuyo procesamiento consta de tres fases:
1. Dispersión: homogeniza la población celular
2. Recolección celular: el programa detecta cuando los poros están bloqueados por el
material (hematíes, células escamosas, moco)
3. Transferencia celular: paso de las células al portaobjetos a través de presión aérea,
después se pasará por una solución de etanol de 96º durante 10-15 minutos para fijar
las células y prepararlas para la tinción
2.2TINCIÓN
Para las citologías exfoliativas o CL se utilizará Papanicolau, que utiliza hematoxilina de
Harris que tiñe de azul oscuro los núcleos, y el Orange G y EA50 que colorean el citoplasma
de colores como el verde o el naranja.
Las punciones o improntas se tiñen con May Grunwald-Giemsa, metodo rapido llamado
Diff-Quick donde los nucleos van de un color azul al purpura-negro y los citoplasmas
violetas o marrón pálido
Para el citodiagnóstico hormonal se usa la tinción de Short que se observa de un color rojo
las células del epitelio vaginal maduras queratinizadas y de azul las no queratinizadas
2.3DIAGNÓSTICO
La muestra se coloca sobre el microscopio y se sigue un sistema de lectura que consiste en
el desplazamiento en sentido vertical por todo el portaobjeto utilizando el aumento del 10
cambiando progresivamente a 20 o 40 cuando se quiera matizar detalles, cuando se
, encuentre algo de interés se marcará la zona con rotulador permanente para localizarlo
con facilidad
3.RECURSOS TECNOLÓGICOS EN CITODIAGNÓSTICO
● INMUNOHISTOQUÍMICA O INMUNOCITOQUÍMICA: procedimiento que se basa en la
utilización de un anticuerpo marcado por un enzimas para formar un complejo con el
anticuerpo. En el caso del VPH se utiliza la inmunodetección de p16 (proteína
involucrada en la apoptosis) que está presente en las infecciones de alto riesgo.
También see emplean metodos de fluorescencia o sustancias cromogenas como la
DAB (diaminobencidina, color marrón) y el AEC (aminoetilcarbazol, color rojo)
● CITOMETRÍA DE FLUJO E IMAGEN: se usan fluorocromos especiales como el yoduro de
propidio o colorantes como la tinción de Feulgen que tiñe los núcleos de rosa
● TECNICAS DE BIOTECNOLOGIA MOLECULAR:
○ PCR: técnica de biología molecular que se basa en la detección específica de
secuencias de ADN del VPH en el material que se va a estudiar. Su fundamento
consiste en multiplicar el número de copias de un segmento de ADN viral y
posteriormente la detección mediante la hibridación con sondas específicas
para cada tipo de VPH
○ HIS: señala secuencias de ácidos nucleicos intranucleares usando
fluorocromos
4.IDONEIDAD DE LA MUESTRA Y ADECUACIÓN DEL FROTIS
Hay que comprobar unos criterios antes de valorar la calidad de la muestra:
● Identificación: Información clínica: comprobar que coinciden los datos de la paciente
con los de la muestra. Hay que observar que la hoja de solicitud presenta la
información clínica necesaria: edad, fecha última regla, tipo menstrual, tratamiento
hormonal, presencia de DIU, intervenciones quirúrgicas, etc.
● Técnica correcta: extensión, fijación y tinción
● Celularidad: se deben observar células escamosas y endocervicales o de
transformación
● Tipos de muestras según el grado de idoneidad:
○ Satisfactoria para evaluación: cumple los apartados, presentan células
escamosas que ocupan el 10% de la superficie del frotis, además, hay que
indicar si hay o no células endocervicales o de transformación
○ Satisfactoria para evaluación pero limitada: se puede hacer un diagnóstico pero
está limitado por la falta de datos clínicos, procesado inadecuado, muestras
insuficientes o por características de la muestra: hemorragia, citolisis,
inflamación, contaminantes, etc. Hay que indicar si se debe repetir la muestra
o se debe hacer un control
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