100% de satisfacción garantizada Inmediatamente disponible después del pago Tanto en línea como en PDF No estas atado a nada
logo-home
Buscado previamente por ti
Buscado previamente por ti
logo
Microbiologie labo: identificatie van een onbekende bacterie 3,49 €   Añadir al carrito
Navegar rápidamente a
Vista previa
  2.  
  3. Katholieke Universiteit Leuven (KU Leuven)
  4.  
  5. Biochemie En De Biotechnologie
  6.  
  7. Microbiologie

Otro

Microbiologie labo: identificatie van een onbekende bacterie
 21 vistas  0 veces vendidas
  • Grado
  • Microbiologie
  • Institución
  • Katholieke Universiteit Leuven (KU Leuven)

In het kader van het practicum Microbiologie was het doel om een onbekende bacterie te identificeren, die afkomstig was van een zelfgekozen contaminatiebron. Wij kozen het speeksel van een Hollandse herder genomen. Uit een gemengde cultuur werd één soort geïsoleerd om een reincultuur op te k...

[Mostrar más]

Vista previa 2 fuera de 15  páginas

Información del documento

  • 12 de enero de 2024
  • 15
  • 2023/2024
  • Otro
  • Desconocido

Temas

  • abstract
  • inleiding
  • microbiële staalname
  • reincultuur
  • kleuringen
  • enkelvoudige kleuring
  • negatieve kleuring
  • gramkleuring
  • endosporenkleuring
  • lactosefermentatietest
  • sim tes
  • differentiële en selectieve media

Escuela, estudio y materia

  • Katholieke Universiteit Leuven (KU Leuven)
  • Biochemie En De Biotechnologie
  • Microbiologie
Todos documentos para esta materia (2)

Vendedor

avatar-seller
caramestdag

Comentarios recibidos

Vista previa del contenido

Biochemie & Biotechnologie
Groepsnummer 10
Maud Debaene, Solène Lemaire, Cara Mestdag, Lorn Vanderperren


Microbiologie - [G0N16a]
Identificatie van een onbekende bacterie uit het speeksel van een Hollandse Herder


1. Abstract
In het kader van het practicum Microbiologie was het doel om een onbekende bacterie te identificeren, die afkomstig
was van een zelfgekozen contaminatiebron. Hiervoor werd het speeksel van een Hollandse herder genomen. Uit een
gemengde cultuur werd één soort geïsoleerd om een reincultuur op te kweken. Verschillende testen, waaronder
visuele testen en het gebruik van selectieve media zoals de ureasetest en de mannitol-zout-agarplaat (MSA-plaat),
werden uitgevoerd om de metabolische activiteit van het onbekende organisme te achterhalen. Morfologische
karakterisering gebeurde door microscopische en macroscopische onderzoeken met kleuringen en selectieve media.
Ten slotte werd DNA-barcoding toegepast als laatste stap om de onbekende bacterie te identificeren, waarbij
polymerase chain reaction (PCR) werd toegepast op het 16S ribosomaal RNA. Op basis van onze bevindingen
concluderen we dat de onbekende bacterie waarschijnlijk Stenotrophomonas rhizophila sp. is.




2. Inleiding
Micro-organismen, waaronder bacteriën, vormen een onmisbaar onderdeel van onze wereld. Hun veelzijdige
functies reiken ver tot de kern van ons bestaan en vinden toepassingen in diverse domeinen, waaronder de natuur,
wetenschap, gezondheid en technologie.

Dit onderzoek richt zich op de identificatie van een onbekende bacterie, afkomstig uit het speeksel van een
Hollandse Herder. Gedurende zes practica hebben we uitgebreide testen uitgevoerd met als voornaamste doel de
identificatie van de onbekende bacterie. Door een combinatie van experimenten hebben we getracht de
karakteristieken van de bacterie te ontrafelen, wat essentieel is voor een nauwkeurige identificatie.

We vermoeden dat de onbekende bacterie afkomstig is uit de mondflora. De Hollandse Herder ervaart tandplak, wat
deels veroorzaakt wordt door de fermentatie van suikers tot zuren en andere metabolieten. Op basis hiervan
veronderstellen we dat de onbekende bacterie suikers kan fermenteren.

Dit onderzoek draagt bij aan de wetenschappelijke nieuwsgierigheid over microbiële diversiteit en heeft praktische
relevantie door het identificeren van één specifieke bacteriesoort.




1

, 3. Methoden
3.1 Microbiële staalname van Hollandse Herder
Met een steriel werkvelddoek uit een wondzorgset werd speeksel afgenomen uit de mond van een
Hollandse Herder en vervolgens in het laboratorium overgebracht naar een gemerkte
tryptische soja- agarplaat (TSA- plaat). Dit gebeurde door met 70 % ethanol ontsmette handschoenen eerst
de contaminatiebron aan te raken en vervolgens over de plaat te wrijven. De TSA-plaat werd gedurende
drie dagen geïncubeerd bij 25 °C om de mogelijk aanwezige micro-organismen te laten groeien.


3.2 Reincultuur maken
Één kolonie werd geselecteerd op de TSA-plaat (Bijlage Figuur 1) en overgeënt met een steriele oogentnaald
op een nieuwe gemerkte TSA-plaat via streepentingen (strijkplaatmethode). Daarna volgde een incubatie
van drie dagen bij 25 °C om de reincultuur op te kweken.


3.3 Differentiële en selectieve media
Er werd telkens één kolonie uit de reincultuur (Bijlage Figuur 2) overgeënt naar een gemerkte
mannitol- zout-agar (MSA) (Bijlage Figuur 3) en een gemerkte MacConkey-agar (Bijlage Figuur 4) via
streepentingen. Vervolgens volgde een incubatie van twee dagen bij 37 °C. Het resultaat gaf aan of de
bacterie mannitol en/of lactose fermenteerde.

De MSA-plaat bevatte een medium met een hoge zoutconcentratie, samen met mannitol en een pH-indicator
fenolrood. Bij fermentatie worden zuren gevormd, waardoor de agarplaat geel kleurt.

De MacConkey-agar bevatte lactose, galzouten, kristalviolet en de pH-indicator neutraalrood. Wanneer
bacteriën zuren produceren door lactosefermentatie wordt de plaat rood. Zonder lactosefermentatie zal de
agarplaat geel en transparant zijn. Daarnaast is de MacConkey-agar selectief voor gram-negatieve bacteriën.


3.4 Kleuringen
3.4.1 Enkelvoudige kleuring
Op een gemerkt draagglaasje plaatsten we een druppel water, waarna we met een steriele entnaald het
inoculum met de druppel vermengden en uitsmeerden tot een diameter van twee centimeter. Vervolgens
droogde het preparaat aan de lucht, waarna drie druppels methyleenblauw werden toegevoegd. Deze
kleurstof kleurde de cellen, waardoor de structuur van de cel zichtbaar werd. Na drie minuten spoelden
we de overmaat aan kleurstof voorzichtig weg met kraantjeswater. Ten slotte droogden we het
droogglaasje en bekeken we het onder de lichtmicroscoop met vergroting 6,5 (Bijlage Figuur 5).

3.4.2 Negatieve kleuring
Op een gemerkt draagglaasje plaatsten we een druppel nigrosine, waarna we met een steriele entnaald
het inoculum met de druppel vermengden en uitsmeerden door een dekglaasje. Vervolgens droogde het
preparaat aan de lucht en bekeken we het onder de lichtmicroscoop met vergroting 6,5
(Bijlage Figuur 6).
2

Los beneficios de comprar resúmenes en Stuvia estan en línea:

Garantiza la calidad de los comentarios

Garantiza la calidad de los comentarios

Compradores de Stuvia evaluaron más de 700.000 resúmenes. Así estas seguro que compras los mejores documentos!

Compra fácil y rápido

Compra fácil y rápido

Puedes pagar rápidamente y en una vez con iDeal, tarjeta de crédito o con tu crédito de Stuvia. Sin tener que hacerte miembro.

Enfócate en lo más importante

Enfócate en lo más importante

Tus compañeros escriben los resúmenes. Por eso tienes la seguridad que tienes un resumen actual y confiable. Así llegas a la conclusión rapidamente!

Preguntas frecuentes

What do I get when I buy this document?

You get a PDF, available immediately after your purchase. The purchased document is accessible anytime, anywhere and indefinitely through your profile.

100% de satisfacción garantizada: ¿Cómo funciona?

Nuestra garantía de satisfacción le asegura que siempre encontrará un documento de estudio a tu medida. Tu rellenas un formulario y nuestro equipo de atención al cliente se encarga del resto.

Who am I buying this summary from?

Stuvia is a marketplace, so you are not buying this document from us, but from seller caramestdag. Stuvia facilitates payment to the seller.

Will I be stuck with a subscription?

No, you only buy this summary for 3,49 €. You're not tied to anything after your purchase.

Can Stuvia be trusted?

4.6 stars on Google & Trustpilot (+1000 reviews)

45,681 summaries were sold in the last 30 days

Founded in 2010, the go-to place to buy summaries for 14 years now

Empieza a vender
3,49 €
  • (0)
  Añadir