Notas de lectura
Equipamiento de un laboratorio de cultivos: material, equipos y reactivos
- Grado
- Cultivos celulares
- Institución
- Cultivos Celulares
Apuntes sobre el equipamiento necesario en un laboratorio de cultivos celulares.
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Equipamiento de un laboratorio de CCMaterial, equipos
Material, equipos yy reactivos
reactivos
1. Aspectos generales del laboratorio
Respecto al instrumental de uso habitual en el laboratorio, necesitaremos material básico de laboratorio
(tubos de ensayo para hacer alícuotas y centrifugar, puntas de pipeta, micropipetas, etc.) y material
específico para el cultivo celular.
Además de este tipo de materiales, debemos distinguir: el material volumétrico y el no volumétrico.
Material volumétrico: están diseñados para mediciones y
transferencias exactas de volumen, un pequeño incremento o
disminución del volumen de líquido contenido da lugar a una variación
grande en el nivel de dicho líquido. Normalmente están calibrados para
su uso a una Tª aproximada de 20ºC, ya que el volumen ocupado por
una determinada masa varía con la temperatura.
Según su calibración distinguimos:
o Instrumentos calibrados para verter ("vert", "Ex", "TD" (to deliver)): la cantidad de líquido vertido
corresponde exactamente al volumen indicado (se tiene en cuenta la humectación en su calibrado). Sería
un ejemplo, una pipeta.
o Instrumentos calibrados para contener ("cont", "In", "TC" (to contain)): la cantidad de líquido
vertido se encuentra reducida, ya que una parte del volumen queda adherida a la pared. Es, por ejemplo,
un matraz aforado.
Enrase y menisco: para realizar una lectura
correcta de un volumen utilizando una probeta,
bureta o pipeta, es necesario que los ojos del
observador estén a la misma altura que el menisco
del líquido, ya que, en caso contrario la lectura será
incorrecta.
Material no volumétrico:
1
, 1.1. Materiales generales
1. Matraces aforados (sin tapón, con tapón, cuello graduado, de dos enrases).
2. Buretas: valoración de disoluciones de concentración desconocida.
3. Probetas: medida de volumen que requieran poca precisión
4. Vasos de precipitados: preparación de reactivos y contenedores (no calibrados)
5. Matraces Erlenmeyer: contener, calentar, disolver, etc. (no calibrados)
6. Tubos de ensayo: calentar, efectuar reacciones, disolver, contener, etc. (con o sin tapón, con o sin
graduación, de múltiple uso o desechables).
7. Tubos de centrífuga
8. Frascos lavadores: contener agua destilada o soluciones de lavado.
9. Varillas de vidrio o agitadores: agitar y mezclar disoluciones.
10. Gradillas: soporte para tubos de ensayo y centrífuga, falcon, cubetas, etc.
11. Embudos: transferir, filtrar, separar (con llave), etc.
12. Escobillones y escobillas: limpieza
13. Portaobjetos: preparar y visualizar preparaciones al microscopio (algunas veces se emplean para realizar
reacciones en el propio portaobjetos)
14. Cubreobjetos: recubrir la preparación para observarla al microscopio
15. Cubetas: contener, medir (espectrofotometría: de plástico, vidrio o cuarzo para ultravioleta, NaCl o CaF2
para infrarrojo)
16. Pipetas Pasteur y cuentagotas
17. Asas de siembra: inoculación y transferencia de cultivos (desechables, calibradas, de metal, de platino,
de plástico, etc.)
1.2. Materiales específicos: pipetas
La función de las pipetas es dispensar o transferir y
aspirar volúmenes (normalmente: 1-50 ml). Hay
diferentes tipos: pipetas aforadas o volumétricas (un
aforo, doble aforo, con émbolo de aspiración), y pipetas
graduadas (serológica: graduada hasta la punta; tipo
Mohr: calibrado en el tronco de la pipeta).
Vemos el ejemplo de un pipeta aforada, observando toda la información que está contiene rotulada.
o Tiempo de expulsión: Es el tiempo que tarda el líquido en salir del material de volumetría (TEX). Se
encuentra tabulado en el instrumento. Se expresa como un número sumado a la sigla Ex (EX+Tex). En
algunos instrumentos se representa con la letra S que indica vaciado rápido. Por ejemplo: Ex + 15 s significa
que después del vaciado completo debe esperarse 15 segundos para que el líquido remanente salga.
2
, o Tolerancia: representa la clase de exactitud que tiene el instrumento de volumetría. Se encuentra
especificada con una marca en la rotulación del material de volumetría. Estas marcas pueden ser: clase
A/AS, la cual expresa que la tolerancia del volumen está dentro de los límites fijados las normas DIM e ISO,
o clase B, que expresa que la tolerancia del volumen está dentro del doble de los límites de error para la
clase A/AS.
5 elementos a los que prestar atención: las pipetas serológicas son tubos largos y
estrechos, graduados y estériles, hechas de poliestireno desechable.
1. Banda de diferente color: cada volumen tiene un color asignado (por ejemplo, amarillo 1ml, naranja
10ml).
2. Resolución: indica el mínimo volumen que puedes medir con la pipeta (por ejemplo, 0,01; 0,1).
3. Incertidumbre: error asociado a la pipeta.
4. Volumen de inicio: puede ser 0 o el volumen nominal de la pipeta (volumen nominal: capacidad calibrada
de volumen mayor de la pipeta). Existen pipetas con la marca de volumen 0 arriba y otras con el volumen
nominal arriba.
5. Volumen final: puede ser el volumen nominal, un volumen parcial o cero.
Las pipetas graduadas tienen un ajuste de clase AS (Ex +
5s) o de clase B (Ex), su escala permite leer volúmenes
parciales. Hay disitntos tipos de pipetas graduadas:
o Tipo 1: volumen nominal abajo, vaciado parcial para
todos los volúmenes.
o Tipo 2: volumen nominal arriba, vaciado total también
para volúmenes parciales.
o Tipo 3: volumen nominal abajo, vaciado total
solamente para el volumen nominal.
En el caso de las pipetas de vaciado parcial se hacen 2
enrases, al llenar y al vaciar, mientras que en las de
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