Resumen para estudiar y comprender el nucleo formativo 2, tecnicas basadas en las reacciones antígeno-anticuerpo secundarias, de inmunodiagnostico cursado en el grado superior de laboratorio clinico y biomedico.
INMUNO TEMA 2: TECNICAS BASADAS EN REACCIONES ANTÍGENO-ANTICUERPO
SECUNDARIAS
2.1-Las tecnicas secundarias
Las tecnicas secundarias valoran las reacciones visibles que se producen en las uniones antigeno-
anticuerpo.
- Reacciones VISIBLES:
Podemos encontrar 2 reacciones:
· Reacciones de aglutinación: Cada anticuerpo se une a varios antigenos y cada uno de
estos a otros anticuerpos y como resultado de estas tantas uniones se forma una red que
provoca una aglutinación en el medio.
· Reacciones de precipitación: las uniones entre el antigeno y el anticuerpo forman complejos
demasiado grandes y pesan, y acaban precipitando en el medio.
- Reacciones NO VISIBLES:
· Fijación del complemento: en este caso se utilizan globulos rojos como revelador, lo que observamos
en esta tecnica es la lisis de los hematies. Esta hemólisis es el indicador visual que revela si el
complemento ha sido jado o no en las primeras fases de la reacción, y por tanto, si los anticuerpos
especí cos están presentes en la muestra de suero del paciente.
2.2- Tecnicas de Aglutinación
Las t cnicas de aglutinaci n se basan en la capacidad que tienen los ant genos particulados
multivalentes para unirse a sus anticuerpos complementarios dando lugar a inmunocomplejos o
agregados visibles a simple vista.
“antígenos particulados multivalentes”: Los antígenos involucrados en la aglutinación suelen estar en forma de
partículas (como bacterias, eritrocitos, o partículas arti ciales recubiertas con antígenos). Son "multivalentes"
porque tienen múltiples sitios en su super cie donde los anticuerpos pueden unirse.
Las IgM son las inmunoglobulinas de mayor poder aglutinante por su estructura pentametrica ya que tiene 10
puntos de unión al antigeno.
La aglutinación se producen cuando la concentración de antigenos y anticuerpo esta equilibrada. En caso de que
este en desequilibrio se produce un fenomeno de zona, con un resultado de falso negativo.
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, Desequilibrios:
- Exceso de antigeno: se bloquean los dos fragmentos fab de los
anticuerpos.
- Exceso de anticuerpo: se bloquean todos los puntos de union del
antigeno.
Dependiendo de si el antigeno sea particulado o haya necesidad de insolubilizarlo, existen dos tipos de reacciones
de aglutinación: direcra e indirecta.
Aglutinación directa:
En esta tecnica se utiliza una suspensión de antígenos formes o particulados. Cuando esta suspensión antigenica
se enfrenta a un suero problema que contiene anticuerpos frente a esos epitopos, se producira la reacción de
aglutinación, la qual se puede ver a simple vista, la forma de visualizarlos depende del soporte que hayamos
utilizado para realizar la reacción:
- Si hemos utilizado un soporte plano: si la reacción es positiva se observaran grumos
- Si hemos utilizado placa de microtitulación: si la reacción es positiva se observara un velo en la super cie
del pocillo.
Las tecnicas de aglutinación directa pueden ser cualitativas (presencia) o semicuantitativas, En las técnicas de
aglutinación directa, la modalidad semicuantitativa se logra precisamente mediante diluciones seriadas del suero,
lo cual permite determinar el título de los anticuerpos presentes. Este título representa la mayor dilución de la
muestra en la que todavía es observable la aglutinación, y efectivamente actúa como una medida relativa de la
actividad o concentración de los anticuerpos.
- Prueba rapida de aglutinación en placa
Ejemplo: diagnostico de brucelosis
Se coloca el antígeno (partículas de Brucella teñidas de rosa) sobre una placa de vidrio y se mezcla con la muestra
de suero. La aparición de aglutinación indica un resultado positivo. Esta prueba es cualitativa y es una herramienta
de detección inicial.
- Hemaglutinación directa
Esta tecnica se utiliza en la determinación del grupos sanguineos del sistema ABO y Rh.
· Antigenos ABO:
- Los antígenos A y B se encuentran en la super cie de los glóbulos rojos
- los anticuerpos contra los antigenos ABO son isohematoglutininas.
· Antígenos Rh: antígeno Rho o D:
- Rh+: eritrocitos con antígeno Rho o antigeno D. Son personas: DD o Dd
- Rh-: eritrocitos sin antígeno Rho o antigeno D. Son personas: dd.
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