Deze samenvatting is per week en met de bijbehorende lesdoelen weergegeven. In de samenvattingen worden zowel de ppt's als de informatie uit de boeken samengevoegd om zo antwoord te geven op de les/leerdoelen.
Test Bank for Molecular Cell Biology 8th Edition by Harvey Lodish, Arnold Berk, Chris A. Kaiser, Monty Krieger, Anthony Bretscher, Hidde Ploegh, Angelika Amon, Kelsey C. Martin
Test Bank for Molecular Cell Biology 8th Edition by Harvey Lodish, Arnold Berk, Chris A. Kaiser, Monty Krieger, Anthony Bretscher, Hidde Ploegh, Angelika Amon, Kelsey C. Martin
Molecular cell biology: Mind maps and important figures
Tout pour ce livre (7)
École, étude et sujet
Hogeschool Rotterdam (HR)
Biologie En Medisch Laboratorium Onderzoek
BCR11 (BCR11)
Tous les documents sur ce sujet (1)
Vendeur
S'abonner
snaijerdeanne
Avis reçus
Aperçu du contenu
Lesdoelen les 5.1
1. De student kan uitleggen welke diverse technieken nodig zijn voor het maken en toepassen
van plasmide-constructen en hoe deze worden toegepast in onderzoek naar cellulaire
functies.
Golden Gate klonering
Bij Golden Gate klonering kan in principe elk stuk DNA aan elk ander stuk DNA geligeerd worden,
want er kan zelf gekozen worden welke overhang gecreëerd wordt. Dit kan d.m.v. PCR worden
gedaan als de restrictie-sites zich niet in het DNA bevinden.
Type IIs restrictie-enzymen (5 bp herkenningssite) knippen naast de herkenningssite en er ontstaan
geen scars. Omdat zelf de overhang wordt bepaald kunnen meerdere fragmenten tegelijk worden
gekloneerd. De herkenningssites moeten voor de RE en bij voorkeur niet in het eindproduct.
Ook mogen er geen polymerases aanwezig zijn, omdat deze kunnen blunten en hierdoor de
fragmenten op iedere plek in elke oriëntatie geligeerd kunnen worden.
Voorbeeld van een restrictie site die vaak gebruikt word is BsaI/BbsI en het is verstandig om geen
restrictie enzymen te kiezen die in 2+ sites knippen.
In de primer: fantasiestukje (4bp)-BsaI site-extra overhang (4bp)
Zodra polymerase de exonuclease inhaalt begint de DNA ligase en dit kan de uiteinden aan elkaar
ligeren. Het proces werkt alleen bij cirkels dus plasmiden.
Gibson klonering
Gibson Cloning maakt geen gebruik van restrictiesites. Er wordt gebruik gemaakt van een 5`-> 3`
nuclease (T5 exonuclease). Deze verwijdert vanaf de 5` kant steeds basen. Je krijgt dan een 5`
teruggetrokken (retracted) uiteinde. Je kunt het ook beschrijven als een 3` uitstekend uiteinde.
Wanneer twee DNA fragmenten gelijke sequenties bevatten maar aan verschillende uiteinden (de
één links en de ander rechts) dan ontstaat er een situatie waarbij de bovenste streng van de een (3`
overhang) past, en dus annealt, op de onderste streng van de ander (ook 3` overhang!). Op dat
moment komt een polymerase in actie. Deze moet sneller aanvullen dan dat de exonuclease af-eet!
Hij moet deze namelijk inhalen! Zodra hij de plaats waar de exonuclease bezig is heeft bereikt, kan
een derde enzym, de ligase de uiteinden aan elkaar ligeren. Vanaf dat moment zijn zowel de
exonuclease als de polymerase op die plaats uitgewerkt.
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur snaijerdeanne. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €5,29. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
