Garantie de satisfaction à 100% Disponible immédiatement après paiement En ligne et en PDF Tu n'es attaché à rien
logo-home
Recherché précédemment par vous
Recherché précédemment par vous
logo
Samenvatting Moleculaire technieken Blok 1 EN blok 2 course 5 €5,99
Ajouter au panier
Accédez rapidement à
Aperçu
  2.  
  3. Hogeschool Arnhem En Nijmegen (HAN)
  4.  
  5. Moleculaire technieken (BM5BC_MOL_TECH)

Resume

Samenvatting Moleculaire technieken Blok 1 EN blok 2 course 5

2 revues
 9 fois vendu
  • Cours
  • Moleculaire technieken (BM5BC_MOL_TECH)
  • Établissement
  • Hogeschool Arnhem En Nijmegen (HAN)
  • Book
  • iGenetics: Pearson International Edition

Deze samenvatting bevat alle colleges van moleculaire technieken van heel course 5. In deze samenvatting is duidelijk onderscheid gemaakt tussen blok 1 en blok 2. Blok 1 kan worden getoetst tijdens de kennistoets en blok 2 bij de thematoets van course 5. Alle technieken die van toepassing zijn gew...

[Montrer plus]

Aperçu 4 sur 49  pages

Infos sur le Document

  • Oui
  • 18 avril 2021
  • 49
  • 2020/2021
  • Resume

Sujets

  • pcr
  • gel elektroforese
  • primers
  • annealing temperatuur
  • polymerase
  • mcs
  • expressie
  • inhibitor
  • vector
  • ion exchange

Livre connecté

book image

Titre de l’ouvrage:

Auteur(s):

  • Édition:
  • ISBN:
  • Édition:

Plus de résumés pour

  • Summary Course 9 Plant Biology term 2
  • GP (Genoom tot Populatie) Zelfstudies (Deel 2/2)
  • Moleculaire biologie course 5 blok 1
Tout pour ce livre (8)

École, étude et sujet

  • Hogeschool Arnhem en Nijmegen (HAN)
  • Biologie En Medisch Laboratoriumonderzoek
  • Moleculaire technieken (BM5BC_MOL_TECH)
Tous les documents sur ce sujet (4)

2  revues

review-writer-avatar

Par: huyentran • 2 année de cela

review-writer-avatar

Par: marlinde1 • 2 année de cela

Vendeur

avatar-seller
sammessing

Avis reçus

Aperçu du contenu

Kloneren: meerdere kopieën van een bepaald gen maken.




IDH1 gen in plasmide plaatsen door middel van restrictie. Om dat te kunnen doen moeten we het
IDH1 gen vermeerderen en restrictie sites aan plakken met behulp van PCR. Als je restrictie sites aan
je gen hebt gemaakt kun je die knippen, dan heb je je gen dat precies in de plasmide geplakt kan
worden en vervolgens in een bacterie zetten die het kan vermeerderen.

PCR
wat heb je nodig voor een PCR reactie?
- DNA template, zit het gen in
- DNA polymerase, enzym dat je nodig hebt om de
nucleotide in de nieuwe streng in te bouwen.
- Primers, want polymerase heeft iets nodig om op vast
te zitten. Startpunt voor DNA polymerase.
- Buffer, pH niveau stabiel houden. DNA polymerase is
een enzym en die heeft een bepaalde pH nodig om te
werken.
- MgCl2, is een zout dat DNA polymerase nodig heeft
om zijn werk te doen.
- dNTP, losse nucleotides die de DNA polymerase in
gaat bouwen in de streng.


DNA template
- plasmide DNA
- genomisch DNA uit de cel
- cDNA (mRNA uit de cel geïsoleerd en vervolgens via reverse trans omgezet naar cDNA) coderende
delen van het gen. Alle intronen zijn eruit.

Hoeveelheid DNA template moet niet te hoog maar ook niet te laag zijn. Te hoog verstoord PCR
reactie.


DNA polymerase
Taq DNA polymerase: uit warme bron bacterie, heft geen proofreading.
pfu DNA polymerase: proofreading activiteit. Maakt minder fouten

,Primer design.
Eerst de kanten van het DNA bepalen.




loaction

,Conditions for a good primer
* 50-60% CG. Meer waterstofbruggen vormen. Binden goed aan het DNA.
* 3’eind moet aan het uiteinde een C of G hebben, omdat de binding dan steviger is en dan kan de
polymerase dit als startpunt gebruiken.
* het kan zijn dat als er sequenties in je primer zitten die complementair zijn aan elkaar, kan de
primer zich dubbelvouwen. Dan kunnen die complementaire nucleotiden aan elkaar binden en dan is
hij niet bruikbaar want dan zit de primer dubbel gevouwen in plaats van dat hij op het DNA kan gaan
binden. Dat dubbelvouwen noemen we een hairpin formation.
* wat we ook niet willen is dat sequenties in zitten die aan elkaar gaan zitten  primer dimer
formation.
* afstand tussen de primers is 1 tot 2 kb, maar niet groter. Hangt wel af van het gen. (voor normale
PCR)
* Annealing temperatuur 55-65 graden Celsius. De temperatuur waarbij de primer goed en specifiek
op je DNA gaat vast zitten. Primers mogen niet te veel verschillen in de annealing temperatuur, niet
meer dan 5 graden celcius.

ATG is startcodon.
TGA is stopcodon.
Primers zijn tussen de 19-24 nucleotide

The PCR program
wat gebeurd er tijdens de stappen en waarom hebben we die nodig?
Denaturatie, annealing en elongatie




denatureren
annealing
elongatie

, Denatureren: DNA template uit elkaar smelten, zodat de primers kunnen binden.
Annealing: startpunt geven voor DNA polymerase om het DNA te verlengen.
Elongatie: verlengen van het DNA.
- deze stappen herhaal je een aantal keer.



Op welke temperatuur en waarom?
rond de 95 graden, maar het hangt af van de DNA polymerase die je gebruikt.
Primers annealing temperatuur: tussen de 55 en 65 graden afhankelijk van de primerset.
Elongatie temperatuur: 72 graden.
opslag tussen de 4 en 14 graden.

te hoge temperatuur?
DNA polymerase is een eiwit, dus deze kan niet tegen te hoge temperaturen en denatureert hij
zichzelf. Optimale temperaturen.
Annealing temperatuur: te laag?  de primers binden niet op de juiste plek aan het DNA template.
De moleculen bewegen namelijk niet zo hard.
temperatuur te hoog? De moleculen bewegen te hard waardoor de primers los laten.
elongatie/extension: hoge temperatuur zodat de polymerase er af gaat.

Wat gebeurd er als de annealing temperatuur tijdens PCR te laag is gezet voor de primers?
Dan krijg je a-specifieke binding en als je pech hebt een a-specifiek product

En een te hoge annealing temperatuur?
De moleculen bewegen teveel dat de primers losraken. Ze kunnen niet binden.  je krijgt geen PCR
product

Wat gebeurd er als de annealing temperatuur tijdens de PCR alleen maar goed is voor één primer?
De andere primer komt op de verkeerde plek te zitten, a-specifieke binding.




Plasmide in DNA
cloning vector

Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:

Qualité garantie par les avis des clients

Qualité garantie par les avis des clients

Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.

L’achat facile et rapide

L’achat facile et rapide

Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.

Focus sur l’essentiel

Focus sur l’essentiel

Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.

Foire aux questions

Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?

Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.

Garantie de remboursement : comment ça marche ?

Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.

Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?

Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur sammessing. Stuvia facilite les paiements au vendeur.

Est-ce que j'aurai un abonnement?

Non, vous n'achetez ce résumé que pour €5,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.

Peut-on faire confiance à Stuvia ?

4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)

64670 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours

Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 15 ans

Commencez à vendre!

Récemment vu par vous

Examen ·

(0)

Chem 219: Exam 3 Questions with Correct Solutions

Examen ·

(1)

GCSE EDEXCEL June 2024 Geography A Paper 3 Mark Scheme

Resume ·

(1)

AQA Geography A level: Hazards case studies notes

Resume ·

(0)

SHORT OVERVIEW OF THE THEORETICAL PART OF M&A

Examen ·

(0)

BCOR 2040: Midterm Questions and Answers 100% Pass

Examen ·

(0)

BSC 108 Exam 1 – Questions With Verified Solutions

Examen ·

(1)

LMRT STUDY GUIDE| 148 QUESTIONS| WITH COMPLETE SOLUTIONS

Critique de livre ·

(0)

Boekverslag "Een hart van steen" - Renate Dorrestein

Resume ·

(0)

Samenvatting practicum longfunctie pathofysiologie III

€5,99  9x  vendu
  • (2)
Ajouter au panier
Ajouté