- Hemato-morfologie: vorm en eigenschappen v bloedcellen
- Hemocytometrie: chemische en fysische metingen
- Hemostase: bloedstolling
- Immuunhematologie
2. PRE-ANALYTISCHE FASE
2.1. BLOEDAFNAME
Venapunctie: veneus bloed uit arm
Arteriepunctie: arterieel bloed uit pols- of liesslagader
Capillaire punctie: capillair bloed door hiel- of vingerprik
Bloed:
- + anticoagulantia (=stollingsremmende stoffen) à volbloed= suspensie v bloedcellen in plasma
- Zonder anticoagulantia à bloedstolling
Centrifugatie:
- Onstolbaar gemaakt bloed
à Plasma= bloed – bloedcellen (buis met anticoagulans)
- Gestold bloed
à Serum= bloed – bloedcellen – fibrinogeen – stollingsfactoren
2.1.1. ANTICOAGULANTIA: BINDING V CALCIUMIONEN
!Onvoldoende vrije calciumionen à bloed kan niet stollen
EDTA= ethyleendiamine tetra-azijnzuur: chelator v Ca2+-ionen
- Hemocytometrisch onderzoek (niet voor morfologisch onderzoek à kleuring aangetast)
- K3-EDTA:
+: lost makkelijk op à werkt snel
-: effect op volume RBC en TC
- K2-EDTA:
+: minder effect op RBC en TC
-: lost minder makkelijk op à minder snel
- EDTA-film of EDTA-oplossing in afnamebuisà goed mengen en juiste hoeveelheid bloed
- Ca2+ kan niet meer gebruikt w
Natriumcitraat: chelator v Ca2+-ionen
- Sedimentatiesnelheid en stollingstesten
- Bestanddeel v ACD-mengsel: onstolbaar maken v bloed vr bloedtransfusie
- In oplossing in afname buis à goed mengen en juiste hoeveelheid bloed
- Ca2+ kan achteraf weer gebruikt w
1
,2.1.2. ANTICOAGULANTIA: REMMING TROMBINE
!Enzymatische activiteit v trombine remmen en werking v antitrombine versterken
Heparine:
- Toepassingen buiten hematologie (niet voor bloeduitstrijkjes, WBC-tellingen)
- Film op afnamebuis à goed mengen en juiste hoeveelheid bloed
- Hemolyse= lyse RBC à rood (vrijgekomen Hb) (onjuiste bloedafname, auto-immuun hemolyse)
- Lipemie: te veel vet à troebeling
- Icterie= verhoogde bilirubinegehalte à oranje (geelzucht)
2
,3. HEMATO-MORFOLOGIE
3.1. UITSTRIJKPREPARATEN V BLOEDCELLEN
3.1.1. MAKEN V UITSTRIJKPREPARAAT
Volbloed zonder anticoagulans: veneus of capillair
EDTA: artefarcten à toegenomen volume v TC, doornappel RBC, vacuolisatie v granulocyten en monocyten,
abnormale of afwezige korreling in neutrofiele granulocyten en afwijkingen in vorm en structuur v celkern
3.1.2. MAKEN V BEENMERGUITSTRIJKPREPARAAT
Beenmergaspiraat (afgenomen onder plaatselijke verdoving à borstbeen of bekkenkam)
à best zonder anticoagulans (niet zo praktisch)
Interpretatie: cytologische kenmerken beoordelen à verhouding v ¹ celsoorten, fijne morfologische details in
individuele cellen
3.1.3. KLEUREN MET MAY-GRÜNWALD-GIEMSA METHODE
Fixeren met absolute methanol, aceton of formaldehyde
à cellulaire structuren bewaren à min aan vervorming of verandering v cellen
Panoptische kleurstoffen
- Zure kleurstoffen (eosine)
• Kleuren basische componenten (kationische groepen v EW: Hb) à rood = eosinofiel
- Basische kleurstoffen (azuurblauw)
• Kleuren zure componenten (anionische groepen v EW of fosfaatgroepen (DNA)à paars = basofiel
3.1.4. BEOORDELEN
Min vergroting: 400x
Kleine vergroting: celrijkdom, verdeling cellen, kwaliteit uitstrijkje à gebied zoeken voor telling
Grote vergroting: tellen met kanteelmethode in vlam
4. HEMOCYTOMETRIE
4.1. CELTELLING
4.1.1. MICROSCOPISCH
Bloed verdunnen à Telkamer
-: traag, arbeidsintensief, weinig hygiënisch, veel mog. foutbronnen à precisie afh v teltechniek en operator
4.1.2. ELEKTRONISCHE TELLING: IMPEDANTIEMETHODE
+: veel meer cellen w geteld à snelheid, reproduceerbaarheid en juistheid
Flowcytometer:
3
, Principe: bloedcellen geleiden elektrische stroom minder goed dan de elektrolytoplossing waarin ze
gesuspendeerd zijn
Werking:
- Cel passeert à sterke v weerstand of impedantie
- Wet van ohm: U=R.I
- 1 puls= 1 cel à # pulsen maat voor # cellen
à gekend volume v celsuspensie à cel concentratie
- Weerstand maat voor volume cel à hoogte v puls is maat voor volume cel
Grote cel= grote weerstand, kleine cel= kleine weerstand
Problemen:
- Fysische krachten in meetopening: vorm vd RBC verandert à volume lijkt groter
- Werveling in celsuspensie à cellen raken niet door celopening
- Pulsvorm= afh v plaats waar cel doorgaat (midden of langs de kant)
- Celafval geteld als cel
- Verstopping v celopening (door samenklitten van cellen, afval)
- Deeltjes simultaan doorheen meetzone (coïncidentie)
Oplossing: hydrodynamische focussering
Principe:
- Dragerstroom met laminaire stroom (geen wervelingen)
- Staal injecteren in centrum v dragerstroom à cellen passeren 1 voor 1 door opening
Onderscheid tss cellen: niet alleen obv volume
- Kanaal 1: telling RBC en trombocyten
• Sterke verdunning
• Volume trombocyten < volume RBC à gemakkelijk onderscheid
• Soms ook WBC geteld maar verhouding WBC/RBC= 1/1000 à verwaarloosbaar
- Kanaal 2: telling WBC
• Minder sterke verdunning
• Detergens à lyse RBC
• Volume trombocyten < volume WBC à verstoren telling niet
4.1.3. ELEKTRONISCHE TELLING: OPTISCHE METHODE MET FLOWCYTOMETER
Principe: bloedcellen detecteren door lichtverstrooiing wnr ze passeren voorbij laserstraal
Werking:
- Lichtsignalen gedetecteerd, opgewekt door snelle doorgang v afzonderlijke cellen doorheen centrum v
flowcel
- Hydrodynamische focussering: cellen 1 voor 1 voorbij lichtstraal à laminaire geleidingsvloeistof
- 2 parameters meten:
• Lichtverstrooiing
• Fluorescentie
Lichtverstrooiing: wnr cel bestraald w met laserlicht ontstaat er elastische lichtverstrooiing met dezelfde l als
inkomend laserlicht
4
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur emmahudders. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €6,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.