Resume
Samenvatting theorie toolbox - biotechnologie
- Cours
- Biotechnologie
- Établissement
- Erasmushogeschool Brussel (EhB)
het onderdeel toolbox van biotechnologie 1 samengevat
[Montrer plus]
Vendeur
S'abonner
Aperçu du contenu
Toolbox biotechnologie: Hoofdstuk 3PCR = polymerase chain reaction / polymerase ketting
reactie
Er is voldoende DNA nodig om een duidelijk bandenpatroon te kunnen herkennen
Belangrijke tool om 1 stukje DNA/RNA in vitro miljoenen keer te vermenigvuldigen in korte tijd (± 2u)
lijkt erg op DNA replicatie in natuur
amplificatie = kleine hoeveelheden DNA vermenigvuldigen
kan zeer specifiek een bepaalde regio van de DNA sequentie detecteren
Toepassingen PCR
Diagnose ziekte en opsoren van genen
Identificatie bacteriën en virussen als er niet genoeg startmateriaal is om het direct op gel te zetten
om aan te tonen wat de ziekteverwekker is
Covid-19 word gediagnosticeerd via een PCR test
Er word een DNA-extratie gedaan van een neus-keelswap met viraal materiaal waar men
vervolgens een PCR reactie op gaat uitvoeren die zeer specifiek is voor Covid-19
Forensisch onderzoek
Vaak zeer weinig DNA materiaal best eerst vermenigvuldigen vooraleer men een deftig
onderzoek kan voeren
Authenticiteit levensmiddelen
GMO’s van bv plantencellen om na te gaan of het organismen (plant) wel degelijk een GMO
plant is of natuurlijke plant
PCR werking en benodigdheden
DNA template = waaruit het te onderzoeken stukje DNA (Target DNA) komt
Primers = enkelstrengig / single-stranded (ssDNA) dat template DNA gaat afbakenen tot target DNA
DNA polymerase = enzym dat ervoor zorgt dat de enkele streng word aangevuld tot een dubbele
streng = verlengen van keten. Kan dit alleen doen als er bouwstenen aanwezig zijn
Bouwstenen = dNTP’s of nucleotiden
Buffer = omdat de DNA polymerase zich in een bepaald medium moet bevinden
Thermocycler = toestel met een thermoblok waarin men snel temperatuurschommelingen kan
teweegbrengen. In deze thermoblok kan men de typische kleine PCR epjes steken (0,5ml)
De 3 stappen van PCR
Denaturatie = dsDNA wordt ssDNA
Annealing = vasthechten van primers (hybridisatie)
Extension / elongatie = verlenging van de keten
Denaturatie bij 95°C
Het splitsen van dsDNA naar ssDNA zodat primers kunnen hechten in volgende stap
waterstofbruggen tussen beide ketens worden verbroken maar covalente bindingen blijven
onaangetast
Annealing / vasthechten primers / hybridisatie bij 50 – 65°C
Vasthechten van primer aan ssDNA
Temperatuur hangt af van welke primer gebruikt word (hoe nucleotidesequentie is opgebouwd)
2 verschillende primers in verschillende richtingen = forward en reverse primer
DNA polymerase heeft startpunt nodig in de vorm van een stukje dsDNA = primers
Primers = kleine stukjes ssDNA, ± 15 tot 40 bp lang, die precies complementair zijn aan de
uiteinden van het stuk DNA waarin we geïnteresseerd zijn
primerdesign = het opleggen van specificaties aan de primers
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur fraukevanmeulder. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €3,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
67474 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans