Uitwerking van alle colleges (en aandachtspunten) van Moleculaire Analytische Methoden (MAM)
26 vues 1 fois vendu
Cours
Moleculaire Analytische Methoden (LB2630)
Établissement
Technische Universiteit Delft (TU Delft)
Book
Principles of Instrumental Analysis, International Edition
In dit document heb ik per college en onderwerp uitgebreid uitgewerkt wat je allemaal moet kennen voor dit vak. Ook heb ik aan het einde van het document aandachtspunten samengevat van dingen die vaak worden gevraagd op het tentamen. Ook staan er enkele voorbeeldvragen met antwoord bij. Er staan hi...
Samenvatting Intrumentele chromatografie en massaspectrometrie met uitwerking opgaves (ICMA)
Samenvatting ISP (VC3)
Tout pour ce livre (3)
École, étude et sujet
Technische Universiteit Delft (TU Delft)
Life Science And Technology
Moleculaire Analytische Methoden (LB2630)
Tous les documents sur ce sujet (1)
Vendeur
S'abonner
emmavanduren
Aperçu du contenu
HC 1: Vloeistof- en gaschromatografie (7/9/21)
Algemeen
Kwalitatieve analyse: hoe ziet het onbekende monster eruit, consistentie, samenstelling,
structuurformule van elke component.
Kwantitatieve analyse: aan- of afwezigheid van een of meerdere componenten in een
monster of gehaltebepaling.
Op welke schaal willen we werken?
Hoe nauwkeurig willen we zijn?
Is er een tijd/geld limiet?
Hoeveel monsters moet ik analyseren?
Wat is de concentratierange? Vaak kan je dit schatten met common sense. Dit is belangrijk
voor het opstellen van de kalibratielijn.
Wat zijn de chemische/fysische eigenschappen van de mogelijke componenten? Interne
standaard kan mogelijk reageren met je sample bijvoorbeeld. Is het wateroplosbaar? Is het
sample gevoelig voor licht, lucht of temperatuur?
Welke componenten kunnen de meting verstoren? Een component die overlapt of je signaal
domineert zorgt voor onjuiste aflezing. Componenten moeten misschien gescheiden worden
bijvoorbeeld.
Kalibratielijn: groeiende concentratiereeks waarvan het signaal lineair is. Die lineairiteit kan
na een bepaalde range veranderen. Je moet dus wel in het bereik van je kalibratielijn meten.
Nauwkeurigheid en reproduceerbaarheid; in elke meting is er sprake van
onzekerheid/spreiding.
o Toevallige fout
§ Ruis
§ Fluctuatie
o Systematische fout
§ Kalibratie
§ Standaard
§ Apparatuur
§ Omgeving
,Inleiding chromatografie
• Wat is het
• Basisprincipe scheiding
o Mobiele/stationaire fase
o Evenwichten
• Chromatogram
o Retentiefactor, schotelgetal, selectiviteit
• GC en HPLC
• Toepassingen
Mengsel: twee of meer componenten zijn gemengd, maar ondergaan geen chemische
interacties met elkaar. Omdat de eigenschappen van de afzonderlijke componenten
onveranderd blijft is het mogelijk ze te scheiden d.m.v. fysische methoden;
• Filtreren
• Centrifugeren
• Decanteren/afschenken
• Magnetisch (ijzeroxide nanoparticles)
• Extractie/verdamping
• Distillatie
• Kristallisatie
• Chromatografie
Chroma (kleur) en graphein (schrijven) is een techniek waarmee mengsels van verschillende
stoffen gescheiden kunnen worden in de samenstellende componenten. Toepassingen:
• Toxicologie
• Sport-doping
• Forensisch onderzoek
• Olie en benzine
• Polymeerindustrie
Chromatografie is een fysische scheidingsmethode waarbij de te scheiden componenten
verdeeld zijn over twee verschillende fasesystemen: een stilstaande fase (stationaire fase S)
en de bewegende fase (mobiele fase M) in een bepaalde richting.
Bij twee fasen is er sprake van een evenwicht. De S, M en analieten (A) vormen een
evenwichtssysteem. A is de te bepalen stof in chemische mengsels, het analiet.
𝐶!
𝐾= (1)
𝐶"
Waar Cs = concentratie van A in S en Cm = concentratie van A in M. De analieten komen aan
met de mobiele fase en hebben tijdens het verblijf in de kolom interacties met de stationaire
fase waardoor ze even blijven ‘plakken’. De interacties verschillen per analiet en hangen af
van de fysische/chemische eigenschappen.
,Toepassingen in de biotechnologie zijn eindeloos. Analyse van metabolieten, vetzuren en
eiwitten. Kwantificatie van de concentratie van monsters in een bioreactor, fermentatie
optimaliseren, zuiveringsprocessen optimaliseren (downstream processing).
Chromatografie kan ook preparatief zijn. Je kan bijvoorbeeld HPLC op grote schaal gebruiken
om componenten werkelijk te scheiden, niet alleen voor analyse. Voor industrie betekent dit
grote kolommen, duizenden liters vloeistof etc.
Gaschromatografie (GC): een kolom (lang) is
ingesloten in een oven om de temperatuur te
controleren. Hieraan is een gascilinder
gebonden, de mobiele fase in contante
toevoer. Ook is er een injectiepunt voor de
samples. Door het gas wordt het door de
kolom meegenomen naar de detector.
Verbindingen moeten vluchtig zijn.
High performance liquid chromatography (HPLC): mobiele fase van vloeistof. Er is druk
nodig om de vloeistof door de kolom heen te drukken. Ook is er weer een injector die de
vloeistof sampled. Het principe is hetzelfde als bij GC, alleen is de mobiele fase anders. HPLC
is duurder dan GC. Ook is het meer wasteful. Toch wordt HPLC meer toegepast omdat niet
alle verbindingen voor GC geschikt zijn.
, Evenwichten in chromatografie worden veroorzaakt door de verdeling van het analiet tussen
de stationaire en mobiele fase. Dit is afhankelijk van:
• Adsorptie; elektrostatische krachten, hydrofobe interacties, v/d Waals
krachten.
• Oplossen; component lost op in een geïmmobiliseerde laag. Het analiet moet
goed oplosbaar zijn in de mobiele fase. Anders gaat het precipiteren op de
kolom.
• Ionenwisseling; ionogene verbindingen adsorberen aan een drager voorzien
van geladen groepen.
• Uitsluiting poriën; M stroomt langs korrels met poriën in de orde van grootte
van de te scheiden stoffen. Sommige componenten komen moeilijker door de
poriën heen dan anderen: scheiding op grootte.
• Biologische affiniteit; onderlinge herkenning en binding van twee moleculen
gebaseerd op specifieke affiniteit. Denk aan enzymen.
Het eluens is de mobiele fase M en het eluaat is de mobiele fase die samen met
componenten (analieten) de kolom verlaat. Een chromatogram is de registratie van het
detectorsignaal als functie van de tijd.
tR = retentietijd
t’R = retentietijd in S
tm = dode tijd
t ’R Wb = piekbreedte basislijn
t’ Wh
Wh = pb op halve hoogte
Wb
Inject
De retentietijd is de tijd die nodig is om voor een component uit de kolom te komen, de
gemiddelde verblijftijd van een component op de kolom. Wanneer een analiet er lang over
doet om de kolom uit te komen krijg je zogeheten piekverbreding. Dit wil je voorkomen om
de resolutie van je chromatogram te verbeteren (overlap voorkomen).
De dode tijd is de tijd die eluens nodig heeft om uit de kolom te komen. Dit is echter geen
piek van M, de oorzaak is een mogelijke detectorverstoring bij het passeren van M of een
onvertraagd component. Dit is NIET de detectie van de mobiele fase. Deze hoort namelijk
geen signaal te geven omdat dit anders de detectie van de componenten verstoort.
De retentiefactor (k) of capaciteitsfactor, is de mate van retentie van een component.
𝑡# − 𝑡"
𝑘= (2)
𝑡"
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur emmavanduren. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €7,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
