Resume
Samenvatting Immunologie: Deel 6 tot 8 professor Proost
- Cours
- Immunologie
- Établissement
- Katholieke Universiteit Leuven (KU Leuven)
Immunologie: Deel 6 tot 8 professor Proost
[Montrer plus]
Aperçu du contenu
Les 5:6. Toepassingen van antistoffen
❖ Aanmaak van polyclonale antistoffen
- Vaccinatie → polyklonale antistoffen maken → B-cellen aanmaken die antistoffen
maken tegen elk van de epitopen → antistoffen kunnen nog een klein beetje
veranderen bij opeenvolgende vaccinaties
- 1 B-cel maakt maar 1 antistof → antistoffen komen in de bloedbaan terecht
→ bloed of serum nemen van patiënt → cocktail van antistoffen tegen eiwitten
- Antistoffen hebben verschillende karakteristieken
- Structuur antistoffen = eiwitten van 150 kD
- Grootste deel = cte domein
- Monoclonale antistoffen: Aangemaakt vanuit 1 individuele B-cel of uit identieke
dochtercellen van die B-cel
- Polyklonale antistoffen zijn beter voor neerslagreacties
❖ Aanmaak van monoclonale antistoffen
- Kankercellen kunnen oneindig delen → kan je blijven kweken
- Van B-cellen die antistoffen maken → soort van kankercel gemaakt door een fusie
van B-cellen met kankercellen → fusie van B-cel en myeloma cel → opkweken in
HAT medium → enkel fusie cel overleeft
- Vanuit 1 enkele fusie cel vertrekken → cultuur aanleggen → alle dochtercel = kloon
→ maken dezelfde antistoffen → monoklonale antistoffen → herkennen 1 bepaalde
epitoop
Aanmaak polyklonale antistoffen Aanmaak monoklonale antistoffen
- Polyklonale antistoffen worden - Een monoclonale antistof is het product
gesecreteerd door meerdere clones van 1 enkele gestimuleerde B cel
antigen-specifieke B cellen
- Fusie van de B cel en een onsterfelijke
- Een proefdier of persoon wordt 1 of myeloma cel
meerdere keren geïmmuniseerd met Ag - HAT medium wordt gebruikt voor de
- Adjuvantia (alum, CFA, poly I:C) selectie van de gefusioneerde cellen
kunnen gebruikt worden samen met
Ag om een sterkere respons te - Productie van massale hoeveelheden van
krijgen single-specifieke Ab
- Het proefdier of de persoon wordt gebloed - Monoclonale Ab zijn zeer specifiek, weinig
en Ab wordt gezuiverd uit serum cross-reactie
- Pro’s:
- Een mengsel van Ab gericht tegen
een waaier aan epitopen wordt
gevormd
, - Polyclonale Ab geven goede
agglutinatie en neerslag
(immunoprecipitatie)
- Contra’s:
- Crossreactiviteit tegen andere Ag
kan optreden
- Verschillende bloedingen
resulteren mogelijk in Ab met
verschillende affiniteit
, ❖ Maken van monoklonale antilichamen
- Muis → immuniseren met antigeen + adjuvant toevoegen → polyclonale responsen
- Meeste B-cellen in de milt en lymfeknopen
- Milt uit muis → B-cellen uithalen → fusioneren met kankercellijn (myeloma cel)
→ fusie cellijnen = hybdridoma's
- Hybridoma's → uitplaten → start: 1 individuele cel in elke cultuur → elke kloon maakt
een monoklonale antistof → opzuiveren
- Nagaan of de clones positief zijn!!
- ELISA: Welke kloon maakt een monoklonale antistof tegen mijn antigeen en
niet tegen andere antigenen?
❖ Selectiemechanisme
- Wat heeft een cel nodig om te delen
→ DNA moet verdubbelen
- DNA synthese blokkeren in de tumorcel
maar niet in de gefusioneerde tumorcel
- Originele tumorcel knock-out maken
voor thymidine kinase en voor
HGPRT → enzymen die base gaan
fosforyleren
- Cel kan terugvallen op rescue weg
die start van uridylaat → fosforylatie
→ 3-fosfaten maken ⇒ inhiberen met aminopterine
- H = hypoxanthine, A = aminopterine, T = thymidine
- Tumorcel geblokkeerd door aminopterine en het ontbreken van hypoxanthine en
thymidine
- Gefusioneerde tumorcel = hybridoma overleeft wel → heeft de kinasen gekregen van
de B-cel
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur chlovanhove. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €20,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
80461 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans