Resume
Samenvatting methoden in biomedisch onderzoek hoofdstuk 8: luminescentie, fluorescentie
- Établissement
- Katholieke Universiteit Leuven (KU Leuven)
Ik was geslaagd voor alle vakken via mijn samenvattingen ;)
[Montrer plus]
Aperçu du contenu
Luminescentie & fluorescentieMethoden hoofdstuk 8
Chemoluminescentie = exotherme reactie waarbij energie wordt opgenomen door
reactieproduct en naar grondtoestand terugkeert door energie vrij te geven in vorm van licht
Fluorescentie = fluorofoor/fluorochroom wordt in aangeslagen toestand gebracht door
absorptie van licht en keert terug naar grondtoestand door emissie licht met lagere energie
Bioluminescentie
Principe
1) Oxidatie van luciferine (met co-factoren)
2) Oxyluciferine aangeslagen toestand
3) Terugkeer naar grondtoestand door vrijgave van licht
In vitro metingen
Luciferase Mg2+
Luciferin + ATP + O2 oxyluciferin + AMP + pyrofosfaat + CO2 + LICHT
In vivo metingen
Bij kortere golflengtes lichtabsorptie door Hb en HbO2
Bij langere golflengtes lichtabsorptie door H2O
Rode en gele golflengte geven beste signaal
Beste signaal 10-20 minuten na injectie van luciferine
Fluorescentie
, Principe
1) Absorptie van licht
2) Deel van licht wordt al afgegeven door interne conversie (vibraties warmte)
3) Terugvallen naar grondtoestand
!! Emissie licht heeft langere golflengte (lagere energie) dan excitatie licht = STOKES SHIFT
Fluorescentie versus fosforescentie
Bij fosforescentie gaat het molecule eerst in een dark state, het molecule gaat niet direct
licht uitsturen maar gaat energie eventjes bijhouden
→ De levensduur van fosforescentie is langer dan die van fluorescentie
→ De energie van fosforescentie is lager dan die van fluorescentie
Spectrum
Intensiteit
Keuze golflengte van excitatie licht heeft invloed op
intensiteit maar niet op spectrum (golflengte
emissie licht blijft hetzelfde)
Golflengte
Factoren die fluorescent signaal bepalen:
- Excitatielicht intensiteit
- Eigenschappen fluorofoor hoeveel excitatielicht omgezet in fluorescentielicht
- Bleaching, quenching & saturatie
- Filter voor detectie van fluorescentielicht
Optische filters
- 525 nm Band pass filter laat enkel golflengtes van invallende licht door rond 525 nm
- 500 nm Long pass filter laat enkel golflengtes van invallende licht door > 500 nm
- 500 nm Short pass filter laat enkel golflengtes van invallende licht door < 500 nm
Selectieve excitatie
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur julievandenabbeele. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €4,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
77254 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans