Deze samenvatting van de moleculaire diagnostiek bevat verschillende technieken, methodes en diagnostische testen om genen/eiwitten/nucleïnezuren etc. te detecteren en te analyseren. Er worden plaatjes bij weergeven om de technieken beter te begrijpen. Ook deze stof wordt getoetst op de tentamens...
Les 1
-Moleculaire diagnostieken:
>Analyseren moleculen DNA/RNA/eiwitten en/of antilichamen
>Pathogenen
>Afwijkingen in genetisch materiaal
-Introductie moleculaire diagnostieken:
>
-Isolatie pathogeen:
>Microscopie
>Cultuur
>Voordelen en nadelen
-Antigeen/antilichaam detectie:
>Serologie/immunologie
>Antigeen-antilichaam
>Interferon-y
>Voordelen/nadelen
-Eiwit detectie:
>MALDI-TOF
>Voordelen/nadelen
-Genoom detectie:
>PCR
>RRT-PCR
>Voordelen/nadelen
-Diagnostische testen:
>Belangrijke aspecten:
*Specificiteit (specifiek zijn voor wat je wilt aantonen)
*Gevoeligheid
*Looptijd (niet te lang duren)
*Training van personeel (niet te moeilijk qua training)
*Apparatuur/lab (wel of niet op het lab)
*Kosten
*Betrouwbaarheid
-Nucleïnezuuranalyse:
>Nucleïnezuur isolatie (en daarna vermeerderen)
>PCR, sequencing
>RNA -> omkeerbare transcriptase
>Geautomatiseerde NA isolatie
*Voorbeeld: Roche MagnaPure
Made by: Iris Gülcher
, >UV-spectrometrie:
*Kwantiteit en kwaliteit
>Gelelektroforese
>Amplificatie: PCR, sequencing (wordt het meeste gebruikt)
-PCR amplificatie:
>Conventioneel vs real-time PCR:
*Kwalitatief (semi-kwantitatief) (niet precieze hoeveelheid) // kwantitatief (precieze
hoeveelheid)
*Eindfasedetectie (je meet op het einde) // detectie exponentiële fase (je meet
voortdurend)
*Open systeem (veel contaminatie) // gesloten systeem (min mogelijk contaminatie
krijgen van het vermeerderde product)
*Minder gevoelig // gevoelig
*Goedkoop // duur
> *Conventioneel op het einde
op de gel zetten
*Als iets eerder opkomt in
expotentiële fase kun je
kwantificeren (omdat er
meer in je product zat))
*Cicle of Quantification (CQ)
treshold (hoe lager CQ hoe
meer je van product hebt)
-Analyse van amplificatie:
>Fluorescentie (het meten van de samples):
*Sybr Green: bindt dsDNA
*Probes: doelspecifieke binding (hybridisatie) (3de stukje nucleïnezuur dat in de
sequentie schuift)
-Sybr Green smeltcurve analyse:
>Doel en andere dsDNA:
*Primer-dimer
*Aspecifieke producten
*Amplificatie afgerond heb je bepaalde hoeveelheid fluorescentie, al het dsDNA ga je
verwarmen (uitsmelten) bepaalde temperatuur gaan de strengen uit elkaar
(enkelstrengs DNA wordt gevormd), fluorescentie signaal zakt en als alles
enkelstrengs is heb je geen fluorescentie meer (50% fluorescentie over =
smelttemperatuur)
Made by: Iris Gülcher
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur iris70. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €5,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
