Resume
BV05MBT samenvatting
- Cours
- Établissement
Dit document bevat een uitgebreide samenvatting van de tentamenstof van BV05MBT. Alle leerdoelen worden behandeld in dit document.
[Montrer plus]
Vendeur
S'abonner
felianne_2000
Aperçu du contenu
Samenvatting MBT, Sarnen vatting MBT
PCR stappen :
Jenaturatie : ( by ca .
95°C )
De DNA template women
-
DNA
2
Strengen Van net Los
Annealing :( by Ca so -
65°C )
afhanuelyu
-
Annealing temperature Van de primers
-
In deice stop binder de primers aan het DNA .
Ex tense / Elongate :C 72°C )
by
Polymerase
-
de primers maauteo het
uerlengt en een DNA sequentle complemental r aan
template DNA .
DNA Replicate in de cel :
door diverse Zoals Helicase
DNA
gerepliceerd
°
wordt in vivo enzymes : .
Primase en
Polymerase .
De DNA Replicate Vindt
op de leading lagging strand
°
plaats en
' '
°
De 5 3
een
verloopt van naar en
de ander d. m.ir .
Ouaeaui
fragment en
Richt Van Replicate
ing
:
DNA door
aangemaaht
°
wordt
polymerase .
dit
enzym beweegt
het
'
over DNA van 3 naar 5 ,
Maar
synthetiseerd 3:
'
Van 5 naar
Verschillen Replicate ( Vitro ) Vs PCR ( vitro ) :
Replicate PCR
°
RNA primers °
Artifkléle DNA
primers
Helicase ( 's )
Oligo
0
°
37°C + Pola °
gboc
Pol
72°C met
tag
°
, PCR
Program ma :
stop 0 Denaturatie
96°C 5- 10min
Stop 1 Denaturation
96°C 15s -
30s
Strap -65°C her halen
2
Annealing 50 15s 30s 30 40 beer
-
-
strap 3 Ex tense 72 °C 30s
-
5min
Stop DNA 72°C 10min
4
syntheses
Annealing ( Hybridisation primer ) :
By -65°C de
annealing temp ( Ta ) afhanuelyu de
°
Ca ideate Van
. 50 .
waarby is
smelt temperature
0
De smelt temperature wordt bereuend door voor alle A ent ,
2°C te teller
en voor eine Gen C . 4°C
°
Om TA te Fwd Tm
de
juste nemen ,
wordt voor RU en primer de bereuend ,
herby
wordt 5°C Tm TA
Laagste gehaald
→
er Van de Dit wordt
je
eleutroforese
Analyse via
Agarose gel :
By eleutroforese wordt het DNA
gescheden op basis Van Grootte
°
agarose gel
een .
hanalen Porién Waardoor het DNA
Ago han
°
3- dimension ace structuur
gel een
rose is met en
grater het Template DNA des te langzamer
Hoe het door die
migreren ☐ .
us
porién en hanalen
gaat .
primer Design :
°
Primers
Zyn Oligonucleotide Complement air n .
aan de 3
'
uiteinde Van
je Template .
De 2
primers ,
Forward ( Fwd ) en Reversed CRVS) net de dubbele
Streng
,
zijn start punt voor
polymerase om
te
syntnetiseren .
°
Om een stun template te
vermenigvuldigen Zyn er
template speafieue primers nodig ,
deee
hand Primer
On twerp
je aan de Van de
design regeis :
*
Primer nucleotiden
lengte van 17 28
-
AT 's
Percentage GC 's
*
Gc tussen 60% template
40 redelyugelyuverdeeld over
-
,
en
*
'
3 end Van de met G of C
primer eindigd
* Zeit annealing
Voor nom →
complementare sequentles
* ( Tm )
Smelttemperatuur -65°C 5°C
tussen so .
primers mogen niet meerdan cut eluaar
tigger .
, Sarnen
vatting kloneren WC 3
Waaromkloneren ?
°
hloneren het DNA daar het te doer :
is manipuleren van on
volgende mee
*
Eiwit hoeueelheden produceren ( coals insulin e)
in
grote
*
Function van of onderzoeuen
genen
☐ omeinen van
genen
*
Effect van mutant en bestuderen
gen
( GFP fluorescent remanent
*
Ondereoeuen wanneer een promoter actief is
kloneer stappen :
Digest
0
ie :
DNA Cplasmide of template) met Restrict ie (RE ) hnippen Restriction enzymen
-
enzymen .
Verbreuen de Suther fosfaat teeter RE hebben does
eigenlyu defunct ie om DNA
-
,
te Knipper op speafieue sequentles en
vervolgends te lineariseren .
RE (Reversed complementair )
-
hnippen op palingdromen
Knip warranties :
RE 's
zijn te under Variates
•
in 2 :
-
sticky end / Bland
-
ends
⑥pµgµ/pµ@
Type Restrict ie
enzymen
:
°
lsoschizomeren Heruennen dezelfde
:
sequentIes
( Restrict ie sites)
Neoschizomeren : Herhennendeeelfde Anders
sequentles Maar unippen
0
,
Isocaudomeren Herhennen dezelfde
sequent es
°
:
Verschillende / ,
Maar
geuen
Sticky -
ends
Digest /e :
lean met 1 of 2
Digest ie
°
restrict ie
enzymen Worden
uitgeuoerd
Digest /e met 1 RE : Uan
Lyden tot zeif
ligate uan de plasmide of het insert is
°
Verwoerd de
in plasmid geligeerd .
Digest RE
Geeftgeen Zelf ligate
°
met 2 insert lean op 1
:
ie en Maar manier
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur felianne_2000. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €7,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
80364 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans