,Samenvatting:
Eukaryoten:
- Celkern
- Lineair genomisch DNA in kern
- Circulair DNA in mitochondria en chloroplasten (alleen planten)
- Organellen
- Groter
- Soms een celwand (planten)
Prokaryoten:
- Geen Celkern
- Circulair genomisch DNA
- Geen organellen
- Kleiner
- Celwand
Basis DNA polymerase:
1. Replicatie is semi-conservatief en template (matrijs) afhankelijk.
→ De meeste DNA (en RNA) polymerasen hebben een template nodig.
2. DNA polymerase heeft primer nodig.
3. DNA (en RNA) synthese uitsluitend van 5’ naar 3’. Lees richting van 3’ → 5’.
4. Exonuclease activiteiten van DNA polymerase.
→ 5’ → 3’ exonuclease activiteit = primer weghalen. = 1. DNA pol l
→ 3’ → 5’ exonuclease activiteit = proofreading. = 1. DNA pol l
2. DNA pol lll
3. DNA pol gamma
4. DNA pol delta
3
, >DNA replicatie:
DNA → DNA
➢ Eukaryoten:
❖ Initiatie:
Eukaryote celcyclus:
- Tijdens S-fase (synthese) worden chromosomen gerepliceerd.
- Tijdens de M-fase (Mitose) worden de chromosomen verdeeld over de dochtercellen.
^-- Eukaryote genomen veel groter dan prokaryote en replicatievorken 10x langzamer →
daarom bevat het chromosoom vele ORI’s (Origin of Replication).
> ORC binding site = Bindingsplaats voor een origin recognition complex (ORC).
> Unwinding region = Sequentie die rijk is aan A = T (gemakkelijk open te breken).
> Abf1 binding site = Bindingsplaats voor eiwitten die helpen om ORC aan te trekken.
→ ORC zit gedurende de gehele celcyclus gebonden aan een ORI
(behalve tijdens de replicatie van origin zelf)
→ ORI één keer ‘aan’ per celdeling.
> Alleen aan ongefosforyleerd ORC kan een pre replicatie complex
binden > helicase onderdeel van dit complex.
^-- Zodra een ORI is geactiveerd (cel krijgt signaal om te gaan delen),
en de replicatievorken van start zijn gegaan wordt ORC gefosforyleerd.
(Plaatsen van een fosfaatgroep op een van de actieve OH-groepen in
het eiwit)
> Defosforylering van ORC pas aan het einde van de mitose (in de
dochtercellen).
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