Kort maar krachtig. Op slechts 14 pagina's werden de belangrijkste zaken samengevat. Op het eind ook enkele zelf opgestelde (of uit de cursus gehaalde) oefenvragen die ik gemaakt heb ter voorbereiding van het examen (bij vragen mag je me altijd contacteren). Dit document kan gebruikt worden als bas...
DUNNE LAAG- EN PAPIERCHROMATOGRAFIE → scheiding o.b.v. polariteit
Dunne laag Verdeling tussen het aan cellulose
absorbens op glasplaat gebonden water en MF
bv. silicagel (polair)
!! CONDITIONEREN
RF-WAARDE
RETENTIETIJDEN
1. DODE TIJD (t0 of tA)
2. TOTALE RETENTIETIJD (tR)
3. GECORRIGEERDE RETENTIETIJD/ NETTO RETENTIETIJD (t’R)
Factoren die retentie beïnvloeden
1. Verdelingscoëfficiënt K (evenwicht)
2. Verdelingsverhouding k / capaciteitsfactor/ capaciteitsverhouding (kwantitatieve verdeling)
1
, INWENDIGE STANDAARD
Relatieve piekoppervlak = Piekopp. component
Piekopp. inwendige standaard
Identificatie stoffen
Nut Injectievolumes
Onnauwkeurigheden corrigeren Matrixeffect
Kenmerken
1. Stabiel & zuiver + niet voorkomen in originele monster
2. Duidelijke piek
3. Parameters van invloed op de detectie van de gebruikte methode moeten voor IS ca. gelijk
zijn als analiet
4. Concentratie ca. gelijk als analiet
5. Gelijkt qua structuur op de te onderzoeken component (stoffen niet ver uit elkaar elueren →
kortere analysetijd)
6. Mag niet interfereren met analiet
Selectiviteit/ solventefficiëntie Kolomefficiëntie
Streven naar pieken die basislijn gescheiden zijn Streven naar scherpe, smalle pieken
Keuze SF, MF en T Capaciteit van de kolom om nauwe pieken te
produceren
Wordt bepaald door:
1. Schotelgetal (N)
Meer N → smallere piek → betere scheiding
RRT↑ → betere scheiding (piekmax verder uit elkaar)
Meer van 1 afwijkt → betere scheiding Piekbreedte ~ N
2. Theoretische plaathoogte (HETP/H)
Concentratiebepaling
1. Identificatie → RRT vergelijken met standaard
2. Kwantificatie → hoeveelheid bepalen a.d.h.v.
relatieve piekoppervlakte H↓ → N↑ → smallere piek → betere scheiding
Schotelhoogtevergelijking (Van Deemter)
(Factoren die H beïnvloeden)
>1,5 → overlap <1% van de piekoppervlak → basislijnresolu e/ basislijnscheiding
>1,7 → minimaliseert kans dat methode in gedrang komt door minieme variaties in scheidingscondities
2
, 2. VLOEISTOFCHROMATOGRAFIE
SF - Kenmerken:
DOEL: te scheiden mengsel in eluensstroom brengen zonder - Rechte roestvrije stalen buis (pakking)
debietonderbreking - 5 – 30 cm
- Diameter 2,3 – 5 mm
LOAD → capilaire monsterlust (enkele µl) wordt gevuld ! CONDITIONEREN
INJECT → monster wordt naar kolom geleid door injec espuit 1. REVERSED PHASE CHROMATOGRAFIE/ HPLC
SF: apolaire (zwak polaire R-groep), MF: meer polair
Reproduceerbaarheid
2. NORMAL PHASE CHROMATOGRAFIE/ HPLC
SF: polaire R-groep, MF: meer apolair
ISOCRATISCHE ELUTIE vs. GRADIËNTELUTIE (MF)
Op eind aanzuigleiding
Vloeistof voor MF
1. Constant mogelijk pulsvrij debiet (10 µl –
- Gepaste verhouding
10ml/min)
- Verschillende soorten →
→ 2 alternerende plunjerkoppen (ene stuurt
polariteit? UV-detector → registreerd absorbanties i.f.v. de tijd
MF naar kolom, ene zuigt MF aan)
- ! Geen lucht Doorstroomcel = microcuvet, inhoud 10 µl en weglengte 5 – 10 nm
2. Hoge drukken vereist om grote weerstand
ISOCRATISCHE ELUTIE vs. tegen VS-stroming te overwinnen 2 Types:
GRADIËNTELUTIE → max. druk 40 mPa (400 bar) (afh. kolom) 1. Vaste golflengtedetector
Bij opstart: PURGEREN 2. Variabele golflengtedetector (deuteriumlamp)
3
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur Student2302. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €2,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
