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Samenvatting instrumentele analyse 2: spectrofotometrie (2FBT) €5,49
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Samenvatting instrumentele analyse 2: spectrofotometrie (2FBT)

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Instrumentele analyse 2: spectrofotometrie (2FBT- sem1) - UV/VIS, - Fluo, - Nefelometrie - AAS, - AES - ICP-OES Bij vragen mag je me steeds contacteren! Enkele veelgebruikte afkortingen kan je terugvinden in mijn profielomschrijving. Veel succes!!

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  • 5 août 2023
  • 6 août 2023
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  • 2023/2024
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lauradries1
UV/VIS
Licht als een golf
Veel chemische analyses: absorptie of emissie van elektromagnetische straling
Elektromagnetische golven bewegen in vacuüm met lichtsnelheid waarbij:




Elektromagnetisch spectrum
Kleine golflengte = ­f = gevaarlijk




Licht als een deeltje
Lichtdeeltjes = fotonen waarbij




1

,Absorptie van licht
Wanneer foton een deeltje in grondtoestand nadert kan het worden
geëxciteerd. (foton absorberen) (D fotonen DEsprongen)
M + h.f à M*

Na 10-6 tot 10-9s relaxeert het deeltje naar originele toestand waarbij
overtollige energie w overgedragen op het medium. (omgezet in warmte)
M* à M + warmte



Spectrofotometrie
Wanneer in oplossingen absorptie van licht w gemeten/gekwantificeerd =spectrofotometrie.
(ook kwalitatieve analyses: extinctiecurve/lijnenspectrum = typische bepaalde stof)

Relaxatie kan zich ook voordoen als emissie van straling (niet enkel warmte), als dan niet
fluorescent of fosforescent. à staling meten en gekwantificeerd


Transmissie
Transmissie T van licht =
I0 : intensiteit die je op staal stuurt. I: uittredende intensiteit



Extinctie
Verband tss T en c ¹ rechtlijnig. Daarom -log T = E (absorbance-absorbantie ¹ absorptie)
E: geen eenheid. I zonder eenheid gerapporteerd.




Wet van Lambert-Beer
Bij zeer lage concentratie geldt de wet van LB
E=e.l.c

Met:
e = molaire extinctiecoëfficiënt (L.mol-1.cm-1)
c = concentratie (mol/L
l = lengte lichtweg in het monster (cm)

y = ax + b



2

,Extinctiecoëfficiënt
Geldt specifiek bij: 1 golflengte, 1 component, temperatuur (­T ­kinetiek in oplossing)
Niet in mol = specifieke extinctiecoëfficiënt Ex

In farmacie ook vaak extinctie bij 1% en 1cm E11: theoretische E met c 1mv% en 1cm
Extincties van verschillende componenten mogen we bij elkaar optellen.
Egemeten = E1 + EZ + E3



Extinctiecurve
Extinctiecurve toont aan bij welke golflengte gevoeligheid van de meting het grootst is.
lmax = meeste lichtabsorptie
Golflengte < lmax: voor eenzelfde Dc gaat minder E! w opgenomen à lagere
signaalverandering à minder gevoelig




3

,VIS-spectrofotometrie
Analytische chemie voornamelijk l 250- 1000 nm
400 nm – 750 nm = zichtbaar licht of VIS




Colorimetrie
VIS-straling die geabsorbeerd w geeft complementaire kleur aan analyt in oplossing




Kleurencirkel
Complementaire kleuren tov elkaar in kleurencirkel
Geen natuurkundige betekenis maar hulpmiddel
samenhangt gevoeligheid voor kleuren oog




4

, UV-spectrofotometrie
UV-licht 190nm – 400 nm
geabsorbeerd.
Energie-overgangen > VIS
Frequentie ­ E overgang ook ­

Bij licht < 190 nm à absorbeert ook
O2 à maakt metingen moeilijk




Enkelstraal UV/VIS spectrofotometer
Blokschema (examen):




UV: deuteriumlamp 150 – 400 nm
VIS: wolfraam halogeen 320 – 2500 nm
Xenon lamp: 150 – 1000 nm (allebei, vaak fluorimetrie) à 1 selecteren

Lens
Monochromator à prisma of rooster
Golflengte selector / slit --> 1 golflengte selecteren

Detectoren:
- Foto-elektrisch effect (foto multiplyer) stroom w gemeten
- Foto-inductie: halfgeleiders, diodes (modern)

5

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