Resume
Samenvatting Moleculaire en algemene genetica H4
- Établissement
- Universiteit Gent (UGent)
Genetica hoofdstuk 4 Oude examenvragen uitgewerkt in detail Uitgewerkte begrippen
[Montrer plus]
Aperçu du contenu
Genetica Examenvragen Hoofdstuk 4,
,Bij een zaak van vermeende sluikslachting wordt een partij rundvlees in beslag
genomen. Op hetzelfde bedrijf wordt tevens het hoofd van een rund gevonden. Indien
kan bewezen worden dat het vlees en het hoofd van hetzelfde dier afkomstig zijn is de
sluikslachting aangetoond. Beschrijf in detail de moleculair genetische techniek
waarmee u dit probleem zou aanpakken.
Ik zou gebruik maken van het vergelijken van de lengte van de microsatellieten van beide
stalen.
1. Als eerste zal ik een staal van het rundvlees en van de kop nemen.
2. Het DNA uit deze cellen(rundsvlees en kopvlees apart) moet er eerst uit gehaald
worden:
a. Door toevoegen van SDS (sodium dodecyl sulfaat) breekt de celwand.
b. Door toevoeging van EDTA (proteine kinase K), worden de eiwitten kapot gemaakt
door proteine kinase K.
c. Na het doen van een fenol extractie zijn de eiwitten na centrifugeren naar de bodem
gezakt en worden ze verwijderd. (DNA blijft in waterige fase)
d. Het RNA wordt afgebroken via RNase
e. Je hebt nu alleen het DNA
3. Het DNA moet gefragmenteerd worden door verschillende primers die specifiek zijn voor
de microsattelieten die je wilt vergelijken. Dit gebeurt aan de hand van PCR.
a. In een vat zit nu het DNA. Hierbij voeg je deoxynucleotiden, een aantal specifieke
primers en taq polymerase toe (polymerase dat bij hoge temp kan werken =
theromostabiel polymerase)
b. Het DNA laat je op 94 graden denatureren, er zijn nu 2 enkelstrengige DNA
strengen gevormd.
c. Daarna wordt de temperatuur gedaalt naar 50-65 graden afhankelijk van wat voor
primers je gebruikt. De primer gaan nu op de plaatsen zitten die de
microsatellieten flankeren. (upper en lower primer) = anealing
, d. Nu wordt de temperatuur opgedreven naar 72 graden. Taq polymerase gaat vanaf
de primers de deoxynucleotide inbouwen van 5’ naar 3’.= polymerisatie
e. Als men nog een cyclus doet hebben we de fragmenten die we nodig hebben.
We doen daarna nog een paar keer (20-30x) de cyclus om genoeg DNA
materiaal te verkrijgen
4. Nu we de fragmenten hebben gaan we ze scheiden door PAGE (polyacrylamide gel
electroforese). Deze techniek heeft als voordeel dat het een resolutie van 1 bp heeft en
dus deze fragmenten van elkaar kan scheiden.
a. Je doet de fragmenten in een hokje van je PAGE
b. Je zet stroom over deze gel. Aan de bovenkant zit een negatieve lading (de
kathode) en onderaan de positieve lading. Na het aanzetten van stroom zullen
de negatieve DNA fragmenten migrergen door de gel. grote fragmenten
migreren minder ver dan kleine.
5. (Om de fragmenten zichtbaar te maken kan het worden overgezet op een nylon membraan
dmv southern blotting. Na dit gedaan te hebben wordt dit membraan behaldeld met
radioactief gelabelde DNA sondes.) (of behandelen met EtBr) Nu kunnen we de
fingerprint zien. Dit doen we voor het rundsvlees en de rundskop apart, en zetten dit langs
elkaar. Nu kunnen we zien of de microsattelieten overeen komen of niet. Komen ze
overeen is het rundsvlees van de kop.
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur DKGstudentUGENT. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €6,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
67474 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 14 ans