H1 : Inleiding
Biotechnologie: gebruik & manipulatie van biologische systemen ter bereiding natuurlijke
grondstoffen en biomassa
Biologisch systemen: micro-org; plantaardige/dierlijke cellen; enzymen geïsoleerd uit een
levend wezen
Niet: traditionele agricultuur en veeteelt
Fermentatie: synoniem voor gisting. Dit is de afbraak van organische stof zonder
tussenkomst van zuurstof (anaeroob)
Eerste periode
-Prehistorie-1850
-Onbewust gebruik van bacteriën en gisten bij de productie van levensmiddelen
Tweede periode
-Vanaf 1850
-Louis Pasteur ontdekt dat micro-org verantw zijn voor bepaalde chemische omzettingen
-Uitsluiting van contaminaties nog niet mogelijk
Derde periode
-Gebruik van aseptische technieken zuivere culturen
-Farmaceutische productie penicilline
Vierde periode
-Invoer recombinant DNA-technieken
-Doorbraak plant/dierlijke celculturen in productieprocessen
Biotechnologie ≠ recombinant DNA-technieken
- Biotechnologie is veel meer dan recombinant -DNA: Recom-DNA is een vb, een onderklasse
DNA manipuleren
-Gemanipuleerd DNA wordt op stabiele wijze in genoom ingebracht
-aanmaak specifieke eiwitten in industrielichaamseigen mol in grote hoeveelheden
gebruik:
1) neuro-endocriene boodschappers, lymfokines & bloedeiwitten
2) vaccins, monoklonale antilichamen & enzymen
Biologicals
=complex gnm…
-GEEN Klassiek gnm: via chemische synthese aangemaakt
-subklasse: biotech gnm: vb Insuline
Varkensinsuline: verschilt 1 AZ met humaan insuline
Immunogeniciteit
Risico op contaminaties met virale infecties
, Biotech insuline: geproduceerd in bacteriën. = humaan
insuline. Continue bron zonder risico op contaminaties
H2: Basisbegrippen/ technieken
in biotechnologie en genetica
2.1 DNA-RNA
2.1.1 DNA-structuur
Circulair DNA: bacteriële genomen, virussen, bacteriofagen
& plasmiden
-replicatie plasmide-DNA onafh. van replicatie bacterieel DNA
àOnevenredige verdeling van DNA over dochtercellen
2.1.2 Denaturatie-Renaturatie
Denaturatie
-thermisch (verwarmen)
-PH wijziging (sterk zuur/alkalisch)
-destabilisatie ureum/formamide: DNA gedurende langere periode enkelstrengig
houden
Reversibel proces
(↔ denaturatie van eiwitten = irreversibel proces)
o Tm-waarde/Tsmelt
= T waarbij helft basen in een duplex ongepaard zijn
àkenmerken
stijgt bij ↑ [G][T] gehalte : Meer H-bruggen ( GT: 3 H-bruggen ↔ AT: 2 H-bruggen)
, o Renaturatie
= bij temp 25 °C onder Tm-waarde
Detectie denaturatie: UV spectrofotometrie
o 260nm
o Dubbelstrenig:absorbeert minder bij 260nm
o Enkelstrenig:absorbeert meer bij 260nm
àBasen zijn verantw. voor UV-absorptie: door elkaars nabijheid in dubbelstreng
wordt absorbantie onderdrukt
o Tm:waar grafiek verticale stijging heeft
Detectie hoeveelheid DNA + onzuiverheden
1 OD (260 nm) = 50 μg/ml dubbesltrengig DNA
= 33 μg/ml enkelstrengig DNA
Zuivere DNA preparaten OD(260 nm)/OD(280 nm) = 1,8
à Afwijkend getal: onzuiver
à Er bestaan onzuiverheden die de afwijking zullen opheffen
Homologe renaturatie Heterologe renaturatie
Met een volledig compl. stuk identiek DNA Met een niet volledig identiek of
compl stuk DNA
Sneller indien conc. hoger Per mismatch daalt Tm met 1,4 gr
Kationen:↓elektrostatischafstoting
->renat->hogereTm
2.1.2 DNA-Replicatie
- Snelheid: 50-nucleotiden per sec
- Basisprincipe: DNA-baseparing & DNA-templating
- Enzym: DNA-polymerase
- dNTPs: deoxyribonucleotidetrifosfaten
- semi-conservatief: oude streng krijgt nieuwe streng
à replicatievork: asymetrisch -> leading & lagging streng
ontstaan: origins of replication (= DNA-seq 300 nucleotiden AT-rijk)
à initiator eiwit: binden hierop -> DNA-seq herkennen
à DNA-helicasen: binden aan initiator eiwit en halen dubbele helix uit elkaar
à Single-strand DNA-binding eiwit ( SSB): enkelstrenig DNA stabiel houden
à ringvormig eiwit: helpt DNA-polymerase vast te houden op de DNA-streng
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur Farma1912. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €7,49. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.