Grondige nota's van het vak chemische en biomedische analyse onderwezen door professor Peter van Eenoo. Samenvatting gebaseerd op hoorcolleges, Powerpoint en boek. Geslaagd in eerste zit.
,1. Inleiding
− Chemische analyse
• Informatie verschaffen over …
o Natuur van de materie
o Samenstelling van de materie
o Structuur van een bestanddeel (geheel of gedeeltelijk) in monsters van
uiteenlopende complexiteit
• Gebaseerd op fysicochemische metingen met uitgebreid instrumentenpark
! analytische apparatuur van groot belang voor onderzoek in de …
o Proteïnechemie
o Moleculaire biologie
o Medische wetenschappen
o Voedingsindustrie: zware metalen, PCB’s, hormonen, …
o Milieuwetenschappen
o Materiaalwetenschappen
➔ inzicht en kennis van apparatuur is essentieel
− Taak van de biomedicus
• Doordachte keuze van meest geschikte meetmethode maken
• Keuze in praktijk toepassen
• Onderkennen van mogelijke beperkingen en/of moeilijkheden
• Problemen oplossen
1.1 Instrumentele analytische chemie
− kwalitatieve en kwantitatieve karakterisering van de materie
• Kwalitatieve analyse
= identificatie van één of meer chemische bestanddelen
• Kwantitatieve analyse
= bepaling van de hoeveelheid van species in een monster
! a.d.h.v. meting van fysicochemische parameters
o Molariteit = # mol bestanddeel per liter monster = M = mol/l
o Gewichtspercentage = # gram bestanddeel per gram monster = % = %w/w
o Parts per million = # microgram bestanddeel per gram monster = ppm = μg/g
• Chemisch bestanddeel = species = element, ion of (an)organische verbinding
• Materie
o Ganse monster = bulk analyse
o Oppervlak van het monster = oppervlakteanalyse
− Nat chemische methoden instrumentele methoden
• Nat-chemische methode: gebaseerd op chemische reactie om componenten in een
monster te identificeren en te bepalen
! hoge mate van ervaring + tijdrovend + inherent destructief
• Niet-destructieve instrumentele methode
o Uitgevoerd door specifiek ontworpen elektronische instrumenten
gecontroleerd en gestuurd met computers
o Werking:
- Interactie van materie met elektromagnetische straling
- Specifieke eigenschap van de materie
6
,1.2 De analytische benadering
Probleemstelling
= definiëren van probleem
− Vraagstelling: welke informatie wenst men te bekomen over monster/materiaal/proces
• Samenstelling van het monster
o Analyt = het te bepalen bestanddeel
o Matrix = begeleidende bestanddelen
! nagaan of deze interfereren met metingen
Interfererende bestanddelen
Kwalitatieve analyse
− Elementanalyse: elementen in monster identificeren
• Niet-destructief
Bv. XRF (= X-straal fluorescentiespectroscopie)
• Destructief
Bv. ICP-OES of ICP-AES (plasma atoom emissiespectrometrie): identificatie van alle
elementen van PSE uit oplossing
− Moleculaire analyse: moleculen in een materiaal identificeren
• Niet-destructief
Bv. NMR (=nucleaire magnetische resonantiespectroscopie): protonen, koolstof,
andere atomen in chemische verbindingen en hoe atomen verbonden zijn
Bv. IR (infrarood spectroscopie): organische functionele groepen
• Destructief
Keuze van de analytische methode en meettechniek
− Gevoeligheid van concentratiegebied
− Blanco: vergewissen van interferenties bij analyse
• Zuiver oplosmiddel (gebruikt voor bereiding van monsters): instellen basislijn
• Reagens blanco = alle reagentia om monster voor te bereiden op analyse: instellen
basislijn
• Matrix blanco = chemische identiek aan monster (zonder bestanddeel): corrigeren
van spectraallijnen afkomstig van matrix
7
, − Kalibratiestandaard = laboratoriumstandaard
• Bevat gekende concentratie van het te bepalen bestanddeel
• Legt verband tussen
o Analytisch signaal gemeten door instrument
o Concentratie van het te bepalen bestanddeel
− Referentiestandaard
• Bevat gekende samenstelling + concentratie van het te bepalen bestanddeel
• Controle van analytische procedure
• Bepaalt nauwkeurigheid en precisie van de methode
Monstername, monstervoorbereiding en bewaring
− Monstername
• Representatief voor het materiaal
! Niet gecontamineerd
− Monstervoorbereiding
• Verwijderen van gead(ab)sorbeerde onzuiverheden
• Omzetten in een meetbare vorm
o Scheiding of verwijderen van interfererende bestanddelen
Bv. verkleinen, oplossen, extractie, precipitatie, vervluchtigen, …
− Bewaring
• Samenstelling mag niet veranderen door
o Reactie met lucht of licht
- Bewaren onder inert gas of donker
- Invriezen van het materiaal
- Hoge temperaturen of vochtigheid vermijden
- Bewaringsmiddel toevoegen
o Interactie met recipiënt: contaminatie of adsorptie
Uitvoering van de bepaling
− Gemeten fysische parameters
Bv. geabsorbeerd licht, geëmitteerd licht, potentiaalverschil, elektrische stroom
➔ hoeveelheid te bepalen bestanddeel aanwezig in oorspronkelijke monster
• Waarneming van signaal
o Detector: meet fysische, chemische of elektrische signalen
OF Transducer: zet niet-elektrische signalen om in elektrische signalen
- Basislijn + analytisch signaal
! ruis op basislijn = achtergrondschommelingen
- Signaal-tot-ruis verhouding = S/N
▪ Betrouwbare meting: grote S/N
• Kalibratie: verband tussen meetsignaal en concentratie van het te
bepalen bestanddeel
o Kalibratielijn: grootte van meetsignaal i.f.v. concentratie
= S = a + b*C ➔ C = (S-a)/b
- S = gemeten signaal
- C = concentratie
- b = richtingscoëfficient
- a = intercept
8
, o Grafische bepaling
Mathematische bepaling
Bv. Excel, calculator of instrumentele software
▪ Standaardfout
▪ Niet-lineaire kalibaratie
Evaluatie van de meetresultaten
− Specificiteit: mogelijkheid om enkel en alleen een specifiek bestanddeel te bepalen in
aanwezigheid van interferenties
+ selectiviteit
− Sensitiviteit of gevoeligheid
= richtingscoëfficiënt van kalibratielijn
− Lineair werkingsgebied
= interval tussen laagste en hoogste concentratie van bestanddeel
! met gestelde nauwkeurigheid, precisie en lineariteit
Juistheid en precisie
− Accuratesse of juistheid
= aangeven van verschil tussen gemeten concentratie en werkelijke waarde: bias
− Precisie of herhaal-/reproduceerbaarheid
= aangeven van hoeverre herhaalde metingen van concentratie overeenkomen
Detectielimiet – aantoonbaarheidsgrens
= detectiegrens (LOD)
= laagste concentratie van een bestanddeel die men in een monster kan detecteren
! detecteren ≠ kwantificeren
• Concentratie waarvoor S/N = 2 (95% betrouwbaarheidsgrens)
• Concentratie waarvoor S/N = 3 (99% betrouwbaarheidsgrens)
Bepalingslimiet
= bepalingsgrens (LOQ)
= laagste concentratie van bestanddeel die met bepaalde nauwkeurigheid en precisie kwantitatief kan
bepaald worden
• Concentratie waarvoor S/N = 10
• Concentratie waarvoor c = 10 * Sblanco (=standaardafwijking van blanco)
9
, 2. Algemene principes van de spectroscopie
2.1 Interactie tussen elektromagnetische straling en materie
Bv. wit licht na doorgang doorheen kaliumpermangaat kleurt purper
Elektromagnetische straling
− Interactie van stralingsenergie met materie
Absorptie of emissie van elektromagnetische straling
• Kwalitatief criterium
= golflengte/energie van de geabsorbeerde of geëmitteerde straling
• Kwantitatief criterium
= intensiteit
− Straling: dualistisch of tweeslachtig karakter
• Stroom energiedeeltjes (=fotonen)
o Quantumenergie = hoeveelheid energie per foton
-
▪ eV = elektronenvolt = 1.602 * 10-19 C*V
= 8065 cm-1
-
▪ h = constante van Planck = 6.626 * 10-34 Js
▪ Na = 6.0221 * 1023 mol
▪ = golfgetal: aantal golven in cm-1
! korte golflengte = hoge frequentie = hoge energie
• Golfverschijnsel
o Vormt basis voor optische eigenschappen
Bv. reflectie, dispersie, breking en lenswerking
o Voorplanting: transversale golfbeweging
⊥ elektrisch veld = Eyz: verandert sinusoïdaal van grootte en teken
⊥ magnetisch veld = Bxy: verandert sinusoïdaal
o Golfkarakter
- v = frequentie = aantal golven per seconde in Hz
- λ = golflengte
- u = voortplantingssnelheid
▪ In vacuüm: u van EM overal gelijk
▪ In materie: u vertraagt door breking
! n: afhankelijk van golflengte
Spectroscopie
− Studie van interactie tussen stralingsenergie en materie
• Interactie met atomen = atoomspectroscopie
• Interactie met moleculen = molecuulspectroscopie
− Golflengte van de betrokken straling
10
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur emmapot. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €10,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
