De flowcytometer werkt door een laserstraal te richten op individuele cellen die door een meetpunt
stromen. Een "optische vingerafdruk" wordt gegenereerd voor elke cel binnen een heterogene
populatie wanneer deze door de bundel stroomt. Wanneer de cellen worden gelabeld met
fluorescerende probes, kunnen verschillende parameters van elke cel tegelijkertijd worden bepaald.
Aangezien de cellen in hoog tempo worden ondervraagd, kunnen in enkele seconden gegevens en
duizenden cellen worden verkregen.
1000 tot 10.000 cellen/s
Metrie = detectie van lichtsignalen, opgewekt tgv de snelle doorgang
Cyto = van afzonderlijke cellen doorheen het centrum van een, tot een microscopisch kleine
sport gefocuseerde lichtstraal
Flow = wat mogelijk is door de hydrodynamische focusering van de celsuspensiestroom in
een laminaire geleidingsvloeistofstroom
Welk type biologisch staal is het meest geschikt voor flowcytometrische analyse?
Elk partikel of cel in oplossing met een grootte van 0.2 tot 150 µm
Leukocyten in bloed uitermate geschikt
Weefsels minder geschikt: moeten single-cel gemaakt worden
Welke kenmerken van een cel of partikel kunnen door een flowcytometer gemeten worden?
Voor elke cel wordt informatie bekomen over:
Relatieve grootte partikel
Relatieve granulariteit of interne complexiteit
Relatieve fluorescentie intensiteit
3 componenten (hoofdonderdelen) van een flowcytometer + functie?
Vloeistoftanken (fluidics)
geleidingsvloeistof zorgt ervoor dat de cellen tot de lichtbron geraken
afvaltank: vloeistof moet er terug uit komen
Elektronisch systeem (electronics)
Verwerking optische signalen naar digitale signalen: analyseren + interpreteren
Optische bank (optics)
Lasers, filters, lichtbron, detectoren: optische signalen capteren
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