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Samenvatting hoofdstuk 4.5 Identificatie van biomoleculen: Massaspectrometrie

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Samenvatting hoofdstuk 4.5 Identificatie van biomoleculen: Massaspectrometrie 2e bachelor biomedische wetenschappen

Aperçu 1 sur 4  pages

  • 2 avril 2024
  • 4
  • 2022/2023
  • Resume
  • massaspectrometrie
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lottehulselmans
Hoofdstuk 4.5: Massaspectrometrie

Inleiding

Werking: productie ionen in gasfase -> versnelling tot bepaalde snelheid in elektrisch veld ->
scheiding obv massa/lading verhouding vb.: 1000 dalton + H + -> 1001 dalton -> 1001/1 = 1001

Doel: bepaling van

 Chemische samenstelling en /of detectie contaminerende verbindingen
 Structurele informatie verkrijgen (b.v. eiwitten, geneesmiddelen …)
 Concentratiebepalingen van atomen (bv bij ICP-MS), organische verbindingen, biologische
verbindingen




Ionisatie

Ionen kunnen gevormd worden door een elektron van de molecule te verwijderen (= vorming
kationen) of door een elektron aan de molecule toe te voegen (= vorming anionen)

 Kationen en anionen kunnen niet tegelijkertijd geanalyseerd worden

Kationen worden versneld in een stijgend negatief veld (worden aangetrokken door negatieve
elektrode) of in een dalend positief veld (worden afgestoten door positieve elektrode)  omgekeerd
voor anionen

Soorten ionisatiebronnen:

 Elektrospray en ionspray ionisatie (ESI)
 Thermospray ionisatie
 Matrix Assisted Laser Desorption Ionisation (MALDI)
 Surface-Enhanced Laser Desorption/Ionisation (SELDI)
 Argon Plasma

ESI

Moleculen in staal worden geïoniseerd door potentiaalverschil tussen capillair en tegenoverliggende
elektrode -> staal wordt ‘gesprayed’ in verwarmde ruimte -> geladen druppels stoten elkaar af en
duwen zichzelf naar buiten (taylor cone) -> solvent moleculen verdampen stapsgewijs waardoor
enkel geladen peptiden in gasfase overblijven -> door elektrische velden naar massaspectrometer

MALDI

Biologische moleculen worden gespot op een stalen plaatje (MALDI-plaatje), gezamenlijk met een
substantie (matrix) die als energieoverdrager fungeert -> matrix wordt beschoten met laser

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