Proteïnen en het proteoom
Welke eiwitten zijn er tot uitdrukking gebracht in die cellen? Welke mix eiwitten zijn er in die cel? (=
proteoom). Iedere celkern bevat genetische info voor alle mogelijke eiwitten in het lichaam. Alle
proteinen die tot uitdrukking gebracht wordt in een cel = proteoom
Scheiden van proteïnen
In melk zijn er heel veel verschillende eiwitten. We gaan ons richten op het scheiden van eiwitten
obv, grootte, lading oplosbaarheid en specifieke bindingscapaciteit. Vaak willen we eiwitten
analyseren.
Wat we terug vinden aan eiwitten verandert ifv het soort cel, het verandert ifv onze ontwikkeling, ifv
omgevingsfactoren (bv. Op hoogte stage), ifv hormonen.
We moeten proteïnen kunnen afzonderen dmv scheidingstechnieken die gebaseerd zijn op de
eigenschappen van de eiwitten.
Centrifugatie
Eerst gaan we centrifugeren: scheiding obv massa. Als we dat verschillende keren doen zal men een
neerslag bekomen (=pellet) en een supernatan (water in vloeistof boven pellet zit). We gaan
verschillende elementen uithalen door te variëren in snelheid.
En afh van wat we willen bekijken gaan we in bepaalde fracties eiwitten willen afzonderen.
Eiwitten apart krijgen
Uitzouten:
Eiwitten gaan bij bepaalde zoutconcentratie neerslaan. Als we het neerslag behouden en deze weer
uitzouten dan bekomen we andere componenten. Ook bij te zoute oplossing kan met bepaalde
eiwitten denatureren en zelfs breken. De eiwitten gaan neerslaan omdat ze door ionsterkte van het
zout niet meer hun tertiaire of quaternaire structuur gaan hebben.
Dialise:
Scheiden obv een verschil in grootte. We doen dat over semipermeabel membraan. De kleine
moleculen kunnen door het membraan, grotere moleculen zoals eiwitten kunnen er niet door. De
dialise gebeurt door de osmotische gradiënt. Dit kan je maar doen door het verschil aan concentratie
( door het aantal deeltjes en niet door de grootte van de deeltjes). Om evenwicht te bekomen moet
er even veel deeltjes zijn aan wederzijde van het membraan zijn, ze hoeven niet enkel grote of kleine
moleculen. Door vloeistof te verversens kunnen we ervoor zorgen dat alleen de grote moleculen
binnen blijven. Scheiden ifv de grootte obv de osmotische gradient. = dyalise
Gel filtratie chromatografie:
Zien vaak gekleurde fracties in kolom. Kolom wordt gestapeld met grijze
korrels die een opening hebben. Die openingen kunnen variëren. Als we daar
dan een mengsel opleggen van moleculen met verschillende grootte , dan
zullen de grote moleculen het eerst uit te kolom komen. Elusievolume
(hoeveel buffer men op kolom moet gieten vooraleer er iets uitkomt), is het
1
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur emiliea. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €7,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.