Biochemie: thyroïd, steroïd en (poly)peptide hormonen
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Een organische stof die in lage tot zeer lage hoeveelheden door
welbepaalde cellen aangemaakt wordt, gesecreteerd wordt en
een activiteit op doelwitcellen uitlokt. In die doelwitcellen wordt
dan een bepaalde fysiologische respons tot stand gebracht via
specifieke signaaltransductie mechanismen.
definitie hormoon
1. endocrien
doelwitcel veraf gelegen
2. paracrien
3 biologische signalen in onmiddelijke omgeving
-> afstand beperkt door snelle opname, afbraak of immobilisatie
3. autocrien
secreterende cel = doelwitcel
endocriene hormonen stabieler dan paracriene of autocriene
wat is de stabielste biologische signaal
-> moet veraf gaan
- plasmamebraan
- cytoplasma
- kern
ligging van receptoren
moet de bindingsaffiniteit zeer hoog zijn
indien men een grote fractie receptoren wilt satureren, dan ....
-> grootte orde van 10^-8M tot 10^-10M
hoe bereken je de hormoonaffiniteit
10^4 1/M en 10^11 1/M
welke waarde heeft een associatieconstante Ka meestal
10^-11M en 10^-4M
welke waarde heeft een dissociatieconstante Kd meestal
concentratie aan hormoon waarbij de helft van de receptoren
bezet is
-> maat voor de affiniteit tussen hormoon en receptor
wat betekent Kd
, Biochemie: thyroïd, steroïd en (poly)peptide hormonen
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stel dat hormoon concentratie 10^-8M is en Kd=10^-9M, hoeveel
% van de receptor is bezet met hormoon
1. hot experiment
1. toevoegen van radioactief gemerkt hormoon
2. totale binding meten
=> maat voor totale binding
2. cold competitie experiment
1. toevoegen van overmaat niet-radioactief hormoon
2. bezet alle specifieke bindingsplaatsen (verzadigbaar)
3. toevoegen van radioactief gemerkt hormoon
4. bezet niet-specifieke bindingsplaatsen
=> maat voor niet-specifieke binding
procedure voor het opstellen van Scatchard plot model
3. totale binding - niet-specifieke binding
=> maat voor specfieke binding
- Kd
- aantal bindingsplaatsen op receptor
- receptor aantal
Scatchard plot analyse laat bepaling toe van ...
welke verschillen bestaan er tussen hormonen en neurotransmit-
ters
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