Resume
Samenvatting - Moleculaire biologie en DNA technologie
- Établissement
- Hogeschool Gent (HoGent)
samenvatting gemaakt van de slides in combinatie met de cursus en notities die gemaakt werden in de les
[Montrer plus]
Vendeur
S'abonner
Aperçu du contenu
MOLECULAIRE BIOLOGIE & DNA-TECHNOLOGIE
BIOMEDISCHE LABORATORIUMTECHNOLOGIE
Laura Pauwels | Bach 2 | 2023-2024
,H1 : ISOLATIE VAN NUCLEÏNEZUREN
NUCLEÏNEZUREN
STRUCTUUR VAN DNA
- Sequentie geschreven van 5’
naar 3’
- Uiteinden:
5’ => vrije fosfaatgroep
3’ => vrije OH groep
- Anti parallelle strengen
- Waterstofbruggen:
2 tussen A & T
3 tussen C & G
STRUCTUUR VAN RNA
- De 2′ OH in ribose is belangrijk voor de RNA-structuur en functie
- De stabiliteit van RNA-polymeer is veel lager dan die van DNA. DNA is dus
meer geschikt voor langdurige opslag en RNA voor korte termijn functies
- De 2′ OH vergemakkelijkt een reactie die kan breken fosfodiësterbindingen
- Omwille van de 2’-OH in ribose is RNA reactiever en dus minder stabiel
dan DNA.
o DNA → bewaren genetische informatie
o RNA → snelle turnover -> reguleerbaar
- RNA is enkelstrengig
- Kan ook secundaire structuren vormen Vb. Hairpin
- Kan complexe drie-dimensionele
structuren vormen en interacties
aangaan met eiwitten, DNA en
kleine RNA-bindende moleculen Vb.
tRNA
,HET GENOOM VAN EEN PRO- EN EUKARYOTEN
Eukaryoot genoom (cellen die een echte kern hebben Vb. mensen, dieren,
planten, schimmels,...)
o Kern:
Histoneiwitten & nucleosoom
Chromatine & chromosomen (chromosomen zijn de meest
opgerolde vorm van DNA)
chromatine is de actieve vorm
Euchromatine (minder compact en meer actief) &
heterochromatine (meer compact en minder actief)
o Mitochondriën
o Chloroplasten (planten)
Prokaryoot genoom
o Bacteriën verpakken DNA in bacteriële chromosomen en plasmiden
o Bacteriële chromosomen waren ooit vermoedelijk naakt DNA.
Inmiddels is echter bekend dat hun DNA verpakt is vergelijkbaar
met de chromosomen van eukaryoten
o Het belangrijkste bacteriële genoom wordt het
bacteriële chromosoom genoemd
o Het DNA-molecuul is gebonden aan kleine
hoeveelheden eiwit en is gelokaliseerd in een
regio van de bacteriële cel die de nucleoïde
wordt genoemd
o Het bacteriële DNA is negatief super opgerold
en in lussen gevouwen
o De lussen van bacterieel DNA worden op hun
plaats gehouden door RNA’s en eiwitten
, ISOLATIE VAN NUCLEÏNEZUREN
Belang:
I. Zuiver DNA nodig voor enzymatische ‘down stream’ toepassingen
II. Enzymwerking wordt verstoord wanneer DNA niet zuiver is
III. De bewaring van zuiver DNA is veel langer en beter en verhoogt de
stabiliteit
Te beantwoorden vragen
1. Hoe kunnen we cellen openbreken om er DNA uit te isoleren? (cellyse =
homogeniseren van het monster)
Lysemethode is afhankelijk van het staaltype (bloed, haar, weefsels,
organen,…)
Voorbereidende stappen kunnen noodzakelijk zijn (‘pretreatment’)
tijdens de pre-analytische fase (stalen nemen en bewaren)
->hier al een fout
-> kans groot, hoe goed het ook gebeurt, op een fout resultaat
Prokaryote cellen:
o Eencellig, celwand, mucopeptiden
Eukaryote cellen:
o Gisten
Eencellig, celwand, chitine
o Schimmels
Meercellig, celwand, chitine
o Planten
Meercellig, celwand, cellulose
o Zoogdieren
Meercellig, celmembraan
Diversiteit eukaryoten en prokaryoten
-> Verschillen in de cel architectuur
-> verschillende lysemethoden nodig
-> verschillende voorbehandeling nodig
Verschillende opties om aan cellyse te doen:
o Chemisch (Door toevoeging chemische stof)
Detergent
Voorbeeld SDS (sodium dodecyl sulfaat)
Maakt celmembraan kapot door fosfolipiden uit de
celmembraan te gaan halen
Alkalische buffer (NaOH)
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur laurapauwels1. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €3,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
56880 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 15 ans