Histologische onderzoekstechnieken
1 Inleiding
Celbiologen en histologen: onderzoeken structuur van cellen & weefsels → technische hulpmiddelen
2 Optische principes
2.1 Golflengte
3 belangrijke elementen bij microscopen:
Lichtbron
Specimen
Geheel van lenzen → licht gecontentreerd op specimen
Lichtmicroscoop: rechtsreek waarnemen via oculair/ detector
Elektronenmicroscoop: elektronenbundel via elektromagnetische spoelen → fluorescerend scherm
Specimen/ object: golflengte van licht/ elektronenbundel verstoren
Kleine subcellulaire structuren niet zichtbaar: te klein om golflengte te verstoren
2.2 Resolutie of scheidend vermogen
Interferentie: proces waarbij 2/ meerdere golven door combinatie elkaar versterken/ verzwakken
waardoor finaal een golf ontstaat die het resultaat is van de som van de combinerende golven
Beeld = geheel van additieve/ inhiberende inferentie van golven (= diffractie)
Brandpuntsafstand: afstand tussen de lens &
het punt waarin de stralen convergeren na
passage doorgeen de lens
Angulaire apertuur: helft van hoek α vd
lichtkegel vanuit het specimen doorheen de
objectieflens
Resolutie (r): kleinste afstand tussen 2 punten
waarbij deze punten nog als 2 afzonderlijke
punten kunnen gezien worden
golflengte 0.61 λ 0.61 λ
r= = =
brekingsindex∗sin α n sin α NA
NA= numerieke apertuur
Golflengte zichtbaar licht: 400-700 nm → 450nm bij lichtmicroscoop
Brekingsindex lucht: 1.0
Angulaire apertuur 70° en sin = 0.94
0.61∗450 nm
r= =292 nm
0.94
Verhogen door het medium: vb brekingsindex olie = 1.5
0.61∗450 nm
r= =196 nm
1.5∗0.94
2.3 Contrast
Dierlijke weefsels: bijna geen contrast → kleurstoffen (= toxic dus dode cellen)
, 3 De lichtmicroscoop
Baan van het licht:
1. Lichtbron
2. Condensorlens: licht gestuurd & geconcentreerd op
specimen ≠ vergrotingsfactor
3. Objectieflens: vlak boven specimen & vormt primair
beeld
NA bepaalt resolutie & vergroting
4. Oculair lens: primaire beeld opgevangen & vergroot
3.1 Fasecontrast microscoop
Contrast verhogen zonder weefsel te kleuren → levende weefsels
Werking: lichtbundel = verschillende lichtstralen met een gelijke
fase → stralen doorheen object => faseverschil (= nier
waarneembaar voor menselijk oog) → faseverschil omzetten in amplitudewijzigingen (= zichtbaar
voor menselijk oog)
Ring 1: zorgt voor fase
Ring 2: zorgt voor amplitudewijziging
3 soorten afbrekingen:
3.2 Differentieel interferentiecontrast (DIC) microscopie
Dezelfde principes als fasecontrastmicroscopen MAAR DIC microscoop = gevoeliger & 3D aspect door
het schaduweffect
3.3 Fluorescentiemicroscopie
Luminescentie: proces waarbij licht geabsorbeerd
wordt door een molecule waarna deze zelf licht
uitzendt → foton in geëxciteerte status
Excitatielicht: inkomend licht ( kortere
golflengte)
Emissielicht: uitgezonde licht ( langere
golflengte)
Fosforescentie: emissie van licht blijft bestaan na
belichting
Fluorescentie: enkel emissie tijdens het belichten
Photo bleaching: excitatie te lang →
veroorzaakt uitdoving waardoor geen emissie meer wordt
uitgezonden
Fluorescentiemicroscopen: werken met UV-licht → schadelijk voor
het oog
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur elisevandehaterd. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €2,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.