100% tevredenheidsgarantie Direct beschikbaar na betaling Zowel online als in PDF Je zit nergens aan vast
logo-home
Eerder door jou gezocht
Eerder door jou gezocht
logo
Verzameling van alle mogelijke examenvragen van het vak scheiding en zuivering van biomoleculen (BMW: behaald resultaat 18/20) €6,49
In winkelwagen
Snel navigeren naar
Voorbeeld
  2.  
  3. Universiteit Antwerpen (UA)
  4.  
  5. Biomedische Wetenschappen
  6.  
  7. Scheiding En Zuivering Van Biomoleculen

Tentamen (uitwerkingen)

Verzameling van alle mogelijke examenvragen van het vak scheiding en zuivering van biomoleculen (BMW: behaald resultaat 18/20)
 10 keer bekeken  0 keer verkocht

Verzameling van alle mogelijke examenvragen van het vak scheiding en zuivering van biomoleculen (BMW: behaald resultaat 18/20): Hierin staat alles in wat de prof Xaveer Van Ostade heeft aangeven dat je moet kennen voor het examen. Leer deze oude examenvragen (die vaak terugkomen) en je bent er vlot...

[Meer zien]

Voorbeeld 3 van de 20  pagina's

Document informatie

  • 3 november 2021
  • 20
  • 2021/2022
  • Tentamen (uitwerkingen)
  • Vragen en antwoorden

Onderwerpen

Geschreven voor

Alle documenten voor dit vak (32)

Verkoper

avatar-seller
lemmeslodders

Ontvangen beoordelingen

Voorbeeld van de inhoud

Scheiding & zuivering

Elektroforese alle formules


Elektroforese = de beweging van een geladen molecule (macro-ion) in een elektrisch veld, de
nettolading van de molecule is q=ze, waarbij e de eenheidslading is en z het aantal
eenheidsladingen.

Elektroforetische mobiliteit U: is de verhouding van de migratiesnelheid op het elektrische
veld




U= elektroforetische mobiliteit
E= elektrisch veld
q= nettolading

Bovenstaande formule moest worden aangepast, omdat deze formule is voor macromolecule
opgelost in een solvent zonder tegenionen.
De volgende formule houdt wel rekening met elektrostatische krachten tussen de ladingen van
de moleculen en ionen die de elektroforetische mobiliteit verlaagt.




U= elektroforetische snelheid
ze= nettolading
n= viscositeit van de oplosssing
R= Stokes radius; afmetingen van het macro-ion
k= het omgekeerde van de straal r waarover macromoleculen elkaar nog kunnen beïnvloeden -
> beïnvloedt mobiliteit


Proteïnen, RNA en DNA hebben lading als gevolg van zure en basische groepen waardoor ze
migreren in een elektrisch veld bij een pH die verschilt van hun iso-elektrisch punt. De
migratie wordt bepaald door de verhouding van de lading tot de massa: sneller naar anode als
meer negatieve ladingen bevat.

Scheiding op basis van grootte: kleinere moleculen geraken gemakkelijker door de mazen van
het netwerk waardoor ze migreren tegenover grotere moleculen.

Bufferoplossing:
 pH in de elektrode reservoirs en in de dragen blijft constant
 de elektroliet concentratie is aanvaardbaard om de stroom te dragren

,  de elektroforese buffer mag niet reageren met de macromoleculen tijdens de
migratie


Types elektroforese
 Dunlaagelektroforese
 Gelelektroforese
o Agarase gelelektroforese
o Polyacrylamide gelelektroforese
o Iso-elektrofocusering
 Detectie van eiwitten en nucleïnezuren na gelelektroforese
 CBB
 Zilverkleuring
 Fluorochromen
 Identificatie van eiwitten en nucleïnezuren na gelelektroforese
 Western blot
 Southern en Northern blot
 Massaspectrometrie
 Capillaire elektroforese

Dunlaagelektroforese

Platen (glas, teflon, plastiek) worden bedekt met een drager (cellulose, silicia). De platen
worden bevochtigd en verbonden met de elektrodebuffers. De elektroforese wordt in een
afgesloten systeem uitgevoerd, omdat de elektrodebuffers een lage ionensterkte hebben en
vluchtige stoffen kan bevatten. Geladen moleculen gaan bewegen wanneer een spanning
wordt aangelegd. Er wordt gebruik gemaakt van geladen kleurstffen oom de elektroforese op
te volgen. De moleculen bewegen zich door de drager waarbij de drager als zeef fungeert.
(=1D)
2D elektroforese in twee richtingen loodrecht op elkaar in verschillende buffers of in één
richting gecombineerd met chromotografie in de andere richting, gescheiden stoffen zichtbaar
maken met kleurreactie




Gelelektroforese
Scheiding van macromoleculen in een gepolymeriseerd gelsysteem.
Voordelen:

,  Hoge capaciteit
 Gecontroleerde porositeit
 Verhindering convectie (door opwarming buffer)
 Minimaliseren diffusie
 Snelle eletroforetische beweging
Scheiding op basis van moleculair zeefeffect

Agarose gelelektroforese
Scheiding van nucleïnezuren

Agarose gel wordt gemaakt door het oplossen van agarosepoeder. De poriëngrootte wordt
bepaald door de concentratie agarose. Bv. als je grote moleculen wilt scheiden heb je grote
poriën nodig dus een lagere concentratie.
Agarose polymeriseert door afkoeling.
Relatie tussen de afgelegde afstand en de molecuulmassa: de snelheid daalt logaritmisch met
stijgende molecuulmassa:




Rf= afgelegde afstand
M= molecuulmassa
A en B= afhankelijk van elektroforesesysteem en zijn experimenteel te bepalen met referentie
moleculen

Polyacrylamide gelelektroforese
Scheiden van eiwitten en soms voor korte nucleïnezuren
Polyacrylamide gel wordt gemaakt door polymerisatie van acrylamide en N-N’-
methylenebisacrylamide in aanwezigheid van radicalen. De poriëngrootte wordt bepaald door
de concentratie acrylamide en de verhouding acrylamide/bisacrylamide.




T = totale concentratie aan acrylamide/bisacrylamide
C= concentratie crosslinker = bisacrylamide
a= gewicht acrylamide
b= gewicht bisacrylamide
V=volume mengesel
T + C veranderen -> verschillende porositeit




Continue buffersysteem: wanneer elektroforese wordt uitgevoerd met éénzelfde buffer in het
staal, gel en elektrode reservoirs. Scheiding bepaalt door zeefeffect. Nadeel: grootte van het

Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:

√ Verzekerd van kwaliteit door reviews

√ Verzekerd van kwaliteit door reviews

Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!

Snel en makkelijk kopen

Snel en makkelijk kopen

Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.

Focus op de essentie

Focus op de essentie

Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!

Veelgestelde vragen

Wat krijg ik als ik dit document koop?

Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.

Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?

Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.

Van wie koop ik deze samenvatting?

Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper lemmeslodders. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.

Zit ik meteen vast aan een abonnement?

Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,49. Je zit daarna nergens aan vast.

Is Stuvia te vertrouwen?

4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)

Afgelopen 30 dagen zijn er 52510 samenvattingen verkocht

Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen

Start met verkopen
€6,49
  • (0)
In winkelwagen
Toegevoegd