Essay

Labo Verslag biochemie of biotechnologie eiwitzuivering: zuivering van invertase

0 keer verkocht

Vak
Biochemie

Instelling
Karel De Grote-Hogeschool (KdG)

Labo verslag voor het vak biotechnologie of biochemie. Bevat 25 pagina's Inleiding, procedure, oplossingen, Resultaten en besprekingen, besluit, antwoord op een vraagstuk en referentielijst Goed geschreven en overzichtelijk opgebouwd met duidelijke illustraties en schema's

[Meer zien]

Voorbeeld 4 van de 35 pagina's

Bekijk voorbeeld

Geupload op 17 maart 2023
Aantal pagina's 35
Geschreven in 2020/2021
Type Essay
Docent(en) Onbekend
Cijfer 8-9

verslag
labo
eiwitzuivering
isolatie en partiële zuivering van invertase
25 paginas

Volgen

antonmartens Lid sinds 1 jaar 30 documenten verkocht

€11,39

In winkelwagen

Op verlanglijstje

100% tevredenheidsgarantie
Direct beschikbaar na je betaling
Lees online óf als PDF
Geen vaste maandelijkse kosten

Eiwitzuivering:
isolatie en
partiële
zuivering van
invertase
Biotechnologie Labo

Aktepe Melda & Martens Anton
3 CB

Inhoudsopgave

, 3CB 04/10/2021

1. Inleiding.................................................................................................... 2
1.1 Doel.......................................................................................................................... 2

2. Procedure.................................................................................................. 4
2.1 Bereiding van het ruwe extract.................................................................................4
2.2 Zuivering van het ruwe extract door gelfiltratie.......................................................4
2.3 Bepaling van de efficiëntie van de zuiveringsstap....................................................4
2.3.1 Bepaling van de enzymatische activiteit............................................................4
2.3.2 Bepaling van het proteïnegehalte volgens Lowry...............................................8
2.4 Bepaling van de zuiveringsfactor en het % recovery..............................................10
2.4.1 Bepaling van zuiveringsfactor..........................................................................10
2.4.2 Bepaling van % recovery..................................................................................11

3. Oplossingen............................................................................................. 12
3.1 GHS......................................................................................................................... 12
3.2 Oplossingen bereiden.............................................................................................14
4.1 Zuivering van het ruwe extract door gelfiltratie (Äkta Start)..................................18
4.2 Bepaling van de efficëntie van de zuiveringsstap...................................................18
4.2.1 Bepaling van de enzymatische activiteit..........................................................18
4.2.2 Bepaling van het proteïnegehalte volgens Lowry.............................................23
4.3 Bepaling van de zuiveringsfactor en % recovery....................................................24
4.3.1 Zuiveringsfactor............................................................................................... 24
4.3.2 % Recovery...................................................................................................... 26

5. Besluit..................................................................................................... 26

6. Vraagstuk................................................................................................ 27

Referentielijst.............................................................................................. 29

1

, 3CB 04/10/2021

Eiwitzuivering: isolatie en
partiële zuivering van invertase
Dit verslag gaat over proef 6: Eiwitzuivering. De proef bestaat uit 4
verschillende delen. Alle aspecten worden hieronder één voor één
behandeld.

1. Inleiding
Invertase is een enzym dat de omzetting van sacharose (sucrose) tot
glucose én fructose (invertsuiker) katalyseert.

Figuur 1: Reactie invertase

Invertase kan men o.a. vinden in een mengsel dat men verkrijgt na het
autolyseren van gistcellen. Om dit invertase te isoleren uit het ruwe
invertase-extract (supernatans), worden er gepaste scheidingstechnieken
en zuiveringsstappen toegepast. Tijdens deze scheiding moet er rekening
gehouden worden met een zo hoog mogelijke zuiveringsgraad en een zo
min mogelijk verlies van het enzym (% recovery).

Om de parameters % recovery en zuiveringsgraad te bepalen, moeten er
zowel voor als na de zuiveringsstappen de nodige testen uitgevoerd
worden om de enzymatische activiteit en het proteïnegehalte van het
enzym te achterhalen.

1.1 Doel
Het doel van deze proef bestaat uit vier stappen.

In het eerste deel van de proef wordt invertase geïsoleerd uit gisten door
de autolyse van cellen. Zo verkrijgt men het ruwe invertase-extract. Dit is
het staal dat men zal onderzoeken.

In het tweede deel van de proef wordt het ruwe invertase-extract
gezuiverd. Hierbij hanteert men een scheidingsmethode, namelijk
gelfiltratie. Gelfiltratie is een techniek waarbij grote deeltjes worden
gescheiden van kleine deeltjes. De grote deeltjes zullen eerder elueren
dan de kleinere. Om de gelfiltratie te verwezenlijken, wordt er gebruik
gemaakt van het toestel Äkta Start (Cytiva).

In het derde deel van de proef wordt de efficiëntie van de zuiveringsstap
(=gelfiltratie) bepaald. Dit wordt gedaan door enerzijds de enzymatische
activiteit te bepalen en anderzijds het proteïnegehalte te bepalen volgens
Lowry. Om de enzymatische activiteit te bepalen, gebruikt men een kit,
namelijk de Invertase Assay Kit (MAK-118; Sigma Aldrich). Indien deze

2

, 3CB 04/10/2021

twee bepalingen zijn gedaan, kan er iets gezegd worden over de efficiëntie
van de zuiveringsstap.

3

Dit zijn jouw voordelen als je samenvattingen koopt bij Stuvia:

Bewezen kwaliteit door reviews

Studenten hebben al meer dan 850.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet jij zeker dat je de beste keuze maakt!

In een paar klikken geregeld

Geen gedoe — betaal gewoon eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard en je bent klaar. Geen abonnement nodig.

Focus op de essentie

Studenten maken samenvattingen voor studenten. Dat betekent: actuele inhoud waar jij écht wat aan hebt. Geen overbodige details!

Veelgestelde vragen

Wat krijg ik als ik dit document koop?

Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.

Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?

Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.

Van wie koop ik deze samenvatting?

Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper antonmartens. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.

Zit ik meteen vast aan een abonnement?

Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €11,39. Je zit daarna nergens aan vast.

Is Stuvia te vertrouwen?

4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)

Afgelopen 30 dagen zijn er 68175 samenvattingen verkocht

Opgericht in 2010, al 15 jaar dé plek om samenvattingen te kopen

Start met verkopen

Essay

Labo Verslag biochemie of biotechnologie eiwitzuivering: zuivering van invertase

Document informatie

Onderwerpen

Geschreven voor

Verkoper

Ontvangen beoordelingen

Voorbeeld van de inhoud