GC content: 30-70%
Tm = 50-60°C
Geen P-P bindingen
Geen gebonden 3’-uiteinde = vrij: ongewoon dat polymerase bindt en verlengt.
△G > -5kDa = goed
Mutatie aan 5’ prime end: ver van 3’end geen duplex storingen.
GG: steek in primer BsaI-site
= volledige controle over die site want bevindt zich in de primer.
= volledige controle over overhangs
-> klonen.
DNA assemblage: space = complementair -> binden -> assembleer DNA.
- ≠ nulecotiden = ≠ overhang : controle.
- Controle over overhangs -> controle over assembleren van DNA.
(overhangs = programmeerbaar: gepland dan kan je het klonen).
, F Q
Taq = 5’ -> 3’ exonuclease
- Primers zijn niet vertekend (bias)
- GC content
- Tm (lengte primer)
- Probe-primer interacties
- Probe positie moet tussen de 2 primers zijn
- △G
- Specifieke annealing temperatuur.
, 1e getekende figuur = GGC: klonen met type IIs endonuclease om DNA te knippen,
herkenningssite is niet palindromisch en enzymen knippen buiten herkenningssite.
Je kan vreemd DNA introduceren door te knippen met hetzelfde enzym en ligeren in de
vector.
De overhangen zijn gekozen, omdat ze compatibel moeten zijn om aan elkaar vast te hagen
(ligate).
+ knippen buiten herkenningsplaats, wanneer ze ligeren willen ze de herkenningsplaats niet
regenereren -> SCARLESS klonen: vector kan in 1 stap gedaan worden
2e getekende figuur BB: bestaat uit BB-delen = promotor, RBS, knip sequenties en terminators
deze behoren tot de restrictie enzym assembleer standaard, deze laat toe om specifieke
restrictie enzymen te gebruiken om te knippen en dan plakken van de individuele delen tot
een samengesteld deel. Herkenningsplaats kan geregenereerd worden dus een nieuwe
restrictie kan plaatsvinden. Door herhaling -> bouwen van een geheel systeem van
individuele blokken.
+ klassieke afhankelijk van identificeren van specifieke endonucleasen sites = case-by-case.
+ BB: gestandaardiseerd, modulair, robuust en herhaalbaar -> betrouwbaar.
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper VDSA. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €25,49. Je zit daarna nergens aan vast.
