Samenvatting
Samenvatting - Practicum: biotechnologie en biochemie, PCR resultaten (J000496A)
Volledige samenvatting van Practicum PCR resultaten Leerpaden + powerpoints
[Meer zien]Voorbeeld 1 van de 4 pagina's
Voorbeeld 1 van de 4 pagina's
In winkelwagenVerkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
Practicum PCR:Resultaten
Tijdens practicum:
DNA extraheren en amplificeren dmv een PCR reactie
Sporen drager losweken DNA uit celkernen extraheren mbv. Chelex
o Chelex: cellen oiv. osmotische druk openbarsten + DNA komt vrij
Sporen- en referentiestalen
Vrijgekomen DNA: PCR reactie
o Multiplex: 5 verschillende lotie amplificeren
4 STRs merkers (TH01, D21S11, D8S1179 & D18S51) + Amelogeninemerker
Obv. Amelogeninemerker afleiden als het een vrouwelijk of mannelijk staal is
Detectie:
Dmv. Capillaire elektroforese
o Mix van formamide en LIZ (= interne standaard) toevoegen aan de stalen
Voor ze geladen werden op de ce
o Nauwkeurige scheiding en exacte lengtebepaling mogelijk
o Formamide: DNA gedenatureerd houden (enkelstrengig)
o LIZ standaard: interne standaard voor elk staal
Obv. dit staal kan de lengtebepaling uitgevoerd worden
Capillaire elektroforese
Volgorde analyseresultaten
1. STR-profiel van negatieve controle bekijken
a. Moet blanco zijn want geen DNA aan toegevoegd
b. Wel pieken contaminatie
2. STR-profiel van positieve controle bekijken
a. Gekend DNA toegevoegd voor PCR amplificatie
i. We weten exact welke allelen we verwachten voor de verschillende lotie
b. Nagaan of verwachte allelen voorkomen op STR-profiel
i. Correct? PCR is goed doorgegaan
3. Andere stalen vergelijken met elkaar match te vinden tss sporen en referentieprofielen vd.
verdachten
Per staal de interne standaard bekijken
o Oranje aangeduid
o Obv. deze gekende lengtes, worden de lengtes vd. andere allelen bepaalt
o Geen pieken op profiel primer piek zichtbaar?
Enkel weergegeven als er geen duidelijke pieken zichtbaar zijn
Primer piek: helemaal links op profiel want heeft maar een lengte van ±20
basenparen
Piek toont alle ongebonden gelabelde primers: kort dus elueren eerst
Piek aanwezig? Primers toegevoegd aan PCR + PCR product toegevoegd bij
het laden op de capillaire elektroforese (zegt niet dat PCR is doorgegaan)
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper marthevanlerberghe. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,49. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 67474 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen