GENETICA EN EVOLUTIE
HOOFDSTUK 10
PARAGRAAF 1
Blotting = een ‘in vitro’ methode om een
specifiek DNA-, RNA of eiwitmolecuul te
detecteren en kwantificeren
Southern blotting = blotting voor DNA
Northern blotting = blotting voor RNA
Western blotting = blotting voor eiwitten
Stap 1 blotting:
Gelelektroforese – methode om moleculen in een mengsel te onderscheiden op basis van hun
fysieke kenmerken (grootte, lading)
In een elektroforese is:
- De negatieve lading (kathode) boven
- De positieve lading (anode) beneden
- DNA en RNA zijn negatief geladen en worden dus door positieve lading aangetrokken
- Kleinere moleculen zullen sneller bewegen dan grotere moleculen
Kleinere moleculen liggen lager dan grotere moleculen
Moleculen met dezelfde grootte liggen even hoog
Stap 2 blotting:
De moleculen worden van de gel overgebracht naar een speciaal type papier (een membraan) dat
een hoge aantrekkingskracht heeft voor deze moleculen
, Stap 3 blotting:
Gebruik maken van een probe om een specifiek molecuul zichtbaar te maken op het membraan
De probe hecht zich vast aan complementaire nucleïnezuren – hybridisatie
Daarna vindt er autoradiografie plaats – membranen worden blootgesteld aan X-straling
Bij Western blotting (eiwit) zijn de probes antilichamen die binden aan specifieke eiwitten
IN VIVO:
Southern blotting: fluorescence in situ hybridization (FISH) – Een methode die fluorescent gelabelde
probes gebruikt om een specifieke DNA-sequentie in vivo te detecteren.
Northern blotting: in situ hybridization (ISH) – Detectie van RNA of DNA in vivo door hybridisatie met
radioactieve enkelstrengs nucleïnezuurprobes.
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper femkesouren. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,49. Je zit daarna nergens aan vast.