Overig
Voor als je te laat bent begonnen of er niet uitkomt
- Instelling
- Universiteit Leiden (UL)
Hier een voorbeeld. Het lukt echt wel om een voldoende te halen, keep in mind dat dit je eerste verslag is van deze studie.
[Meer zien]Voorbeeld 2 van de 14 pagina's
Voorbeeld 2 van de 14 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
Verkoper
VolgenVoorbeeld van de inhoud
Naam: Xuan Su Naam partner: Karen AalbersStudentnummer: 2488841 Assistenten: Cleo Demeester,
Groep: 1D1 X Romeo Schrage
Datum: 15 oktober 2019
Eiwit:
Isolatie van
His6-b-
galactosidase
, Samenvatting
Het doel was het isoleren van zuiver His6-b-galactosidase uit de bacterie Escherichia Coli (E.
Coli). Hiervoor werden er verschillende preparaten en monsters gemaakt van voor en na de
zuivering. Door de vele monsters werd het makkelijker te bepalen bij welke zuiveringsstap er
verlies aan enzym zou zijn geweest. De zuivering werd gedaan door
affiniteitschromatografie. Door een ionenwisselaar als kolom te kiezen en Imidazol als
structuuranalogon werd er zuiver His6-b-galactosidase verkregen. Door aan de fracties
ONPG toe te voegen werd er bepaald waar de hoogste activiteit had plaats gevonden.
Hieruit kwamen drie piekfracties met zuiver His6-b-galactosidase. De zuiverheidsbepalingen
werden door een SDS-page en een natieve page gedaan. Beiden werden geladen met alle
monsters zodat de resultaten elkaar opvulden als er ergens onduidelijkheid was. Door een
Bradford Assay te gebruiken werd de hoeveelheid eiwit bepaald waarmee berekend werd
hoeveel zuiver His6-b-galactosidase er uiteindelijk is verkregen. De activiteit is gemeten door
een ONPG-assay. De absorbantie werd gemeten in een spectrofotometer en daaruit werd
bepaald wat de reactiesnelheid was. De reactiesnelheid was van belang doordat er met dat
gegeven de opbrengst werd berekend. Er is ook zuiver His6-b-galactosidase verloren gegaan
aangezien de zuiveringsfactor van de oplosbare fractie 2,22 is en die van het gezuiverde
enzym 1,58. De opbrengst zuiver His6-b-galactosidase was uiteindelijk 42%.
Inleiding
His6-b-galactosidase is een enzym die de hydrolyse reactie versnelt waardoor de
glucosidische verbinding tussen glucose en galactose wordt verbroken. Voordat de zuivering
begon werden er preparaten gemaakt waaruit de monsters werden gehaald. Door meerdere
monsters te nemen tijdens het proces werd het mogelijk de opbrengst en zuiverheid goed te
volgen. Dit was handig voor, als er verlies plaats zou vinden, het makkelijk te achterhalen
wanneer dit was gebeurd. Het doel was om zuiver His6-b-galactosidase uit E. Coli te
isoleren. Er werd ook ondervonden of deze methode aan te bevelen is om grote
hoeveelheden of zeer zuiver eiwit te verkrijgen. Eerst werden alle cellen opgebroken (lysis)
van E. Coli. Er werd bij het zuiveren gebruik gemaakt van affiniteitschromatografie. Bij
affiniteitschromatografie wordt de scheiding gedaan door een kolom. Een kolom bestaat uit
materiaal met specifieke bindingseigenschappen. Bij dit experiment was er gekozen voor
een ionenwisselaar wat betekent dat het kolom bepaalde moleculen hecht door elektrische
lading. Hierdoor werd hetgeen wat werd aangetrokken gescheiden van de rest van de
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper xuansu. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €2,99. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 67474 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen