Samenvatting
Samenvatting Histologie
- Vak
- Histologie
- Instelling
- Universiteit Leiden (UL)
Samenvatting colleges Histologie
[Meer zien]Voorbeeld 4 van de 40 pagina's
Voorbeeld 4 van de 40 pagina's
In winkelwagengesponsord bericht van onze partner
Verkoper
Volgen
Voorbeeld van de inhoud
HistologieHoorcollege 1: Technieken
Histologie: Structuur van cellen en hoe ze zijn gerangschikt. Dit heeft te maken met de
functie van de organen.
Er zijn in het lichaam 4 types weefsel te onderscheiden.
• Epitheelweefsel
• Bindweefsel (bot en kraakbeen)
• Spierweefsel
• Zenuwweefsel
Histologie: cel tot functie
Lichtmicroscoop is de belangrijkste tool in de histologie.
Onderdelen om te kennen:
• Oculair
Meestal 10x vergroot
• Objectief
4x tot 40x vergroot
• Preparaat
Stukje weefsel met kleuring
• Condensor
Regelen van de grootte van
het gaatje waar het licht
door heen gaat.
• Diafragma
Regelen van de sterkte van
het licht
,Weefsel inbedden en snijden
1. Het weefsel wordt in kleine stukjes gesneden.
2. Fixatie: Het weefsel wordt in formaldehyde gelegd. Dit moet een gebufferde
oplossing zijn zodat de pH niet te zuur wordt. Er ontstaan cross links in de
molecuulstructuur van de eiwitten. Daardoor worden enzymen inactief waardoor het
weefsel niet meer wordt afgebroken.
3. Dehydratie: Tijdens de dehydratie wordt al het water uit het weefsel gehaald. Dit
gebeurt door het weefsel in hoger oplopende concentraties alcohol (EtOH) te leggen.
4. Clearing: De alcohol wordt weggehaald en het weefsel wordt in organische
oplosmiddel gelegd. Het organische oplosmiddel kan mixen met paraffine, waar het
weefsel uiteindelijk in wordt gelegd.
5. Infiltratie: Het weefsel komt in een bad van paraffine met een temperatuur van 52-
60 graden, omdat paraffine bij deze temperatuur vloeibaar is. Dit blijft staan zodat de
paraffine diep het weefsel binnendringt.
6. Embedding: Paraffine wordt afgekoeld, zodat het vast wordt. Het weefsel is nu
ingebed in paraffine.
7. Snijden: Na het afkoelen wordt het weefsel op maat gesneden. Dit wordt gedaan met
een sledemicrotoom. De blokjes worden dan 3-10 micrometer dun.
Voor welk soort weefsels kan EtOH dehydratie voor een afwijkend beeld van het weefsel
zorgen? - Vetweefsel, dit lost op in ethanol. Ventrikels en holtes omdat het water eruit
wordt gehaald.
2 Soortenfixatie: Immersiefixatie en perfusiefixatie
o Perfusiefixatie: Naald gaat in het hart en direct in de aorta.
Eerst pomp je een buffer door het bloedvatenstelsel van het
dode dier heen. En daarna het fixatief, waardoor je alles van
binnenuit fixeert. Kan alleen als het dier net dood is en het
bloed nog niet gestold is in de aderen.
o Immersiefixatie: Je snijdt een stukje weefsel af en stopt dat in het fixatief. De
buitenkant wordt langer gefixeerd dan de binnenkant. Hierdoor moet je kleine
stukjes afsnijden,
,Snijden van weefsel = vak apart
HE met snijaftefact (slecht mes) HE met gaten in het weefsel
(te snel snijden)
Weefsel preparen: Kleuren
Doel: specifiek weefseltypen/eiwitten zichtbaar maken
Twee type kleuring:
Histochemie Immunohistochemie
- Chemisch -Immunologisch
- Hematoxyline en esoine (HE)
- Periodic acid-schiff reaction (PAS)
- Sundan Black (vetten)
- Metal impregnation (vezels in bijv. Zenuwweefsel).
HE-kleuring (de basis kleuring van de histologie)
Eosine – roze – zure kleuring - kleurt acidofiele (= ‘basische’) celcomponenten
Hematoxyline – paars/blauw – basische kleuring – kleurt basofiel (=’zure’) celcomponenten
• Basische celcomponenten: DNA (nucleus), RNA rijke gebieden in het cytoplasma, matrix
in kraakbeen.
• Zure celcomponenten: cytoplasma, collageen
PAS-kleuring
Schiff’s reagent reageert met de hexose-ringen van polysacchariden.
Van kleurloos naar intens rood.
Bijv. muceus weefsel (slijm)
Vaak tegen gekleurd met HE, zorgt voor een completer beeld.
, Sudan Black
• Vetoplosbare kleurstof, dus kleurt weefsels met veel vet: vezelbanen, vetweefsel.
• Wordt gebruikt voor diagnose van specifieke metabole aandoeningen, waarbij vetten
intracellulair ophopen.
Metaal-kleuring: Golgi
• Zilverkleuring, na impregnatie van het weefsel met o.a. zilvernitraat, wordt het weefsel
behandeld zodat het zilver wordt gereduceerd en zichtbaar is in de neuronen.
• Kleurt neuronen aspecifiek
• Kleurt niet alle neuronen, daarom zo geschikt voor bestuderen van morfologie van
neuronen.
Immunohistochemie
• Immuno = antilichamen (antibodies)
• Het wordt niet alleen voor lichtmicroscopie toegepast, maar ook voor fluorescentie
microscopie en western blot (eiwitdetectie).
Principe: Antilichamen zijn selectief voor een epitoop op een specifiek eiwit.
Antigen is specifiek voor het antilichaam.
o Direct: Het antilichaam wordt gelabeld met een marker. Zo kan je het eiwit waar je
geïntresseerd in bent bekijken.
o Indirect: Stukje weefsel met het eiwit waar je naar wil kijken. Het primaire
ongelabbelde antilichaam bindt op het antigen. Het secondaire gelabelde antilichaam
bindt aan het primaire antilichaam. Er binden er vaak meerderen waardoor er meer
kleur komt op de plek van het eiwit.
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, creditcard of Stuvia-tegoed voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper roosbrink. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €4,49. Je zit daarna nergens aan vast.
Is Stuvia te vertrouwen?
4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)
Afgelopen 30 dagen zijn er 67474 samenvattingen verkocht
Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen