Enkele en dubbele vloeistof-vloeistof extractie (LLE) van p-
nitrofenol
Datum 10 juli 2020
Naam Inge Slootbeek
Labpartner n.v.t.
Docent Niek van Leeuwen
Inleiding
Tijdens het experiment zal de Kow over 1-octanol en waterige oplossingen worden bepaald om de
efficiëntie van enkele en dubbele extracties vast te stellen. De concentratie van p-nitrofenol wordt
met dit experiment bepaald met behulp van een calibratiecurve.
Vloeistof-vloeistof extractie (LLE) is een techniek waarbij er twee fasen van niet-mengbare stoffen
worden gebruikt om de gewenste stoffen te scheiden van de ongewenste stoffen. De fasen zullen
een andere dichtheid hebben en mengen niet door het verschil in polaire en apolaire
atoombindingen. De laag met de grootste dichtheid zal de bovenste laag zijn en de laag met de
kleinste dichtheid zal de onderste laag zijn.
SDS-PAGE is een elektroforese techniek die eiwitten kan scheiden op basis van de grootte. De
eiwitmonsters worden op een polyacrylamide gel gebracht en door middel van spanning zullen de
eiwitten scheiden. De kleine fragmenten lopen sneller door de gel dan de grote fragmenten. Na de
elektroforese zal de gel in een kleuroplossing worden gelegd, in dit geval Coomassie Brilliant Blue.
Nadat de gel in de kleuroplossing heeft gelegen, zijn de eiwitten zichtbaar en kan de grootte van de
eiwitten worden bepaald met behulp van je ladder.
De verwachting is dat de fractie (q) van de dubbele extractie lager zal zijn dan de enkele extractie. Er
blijft dus minder p-nitrofenol achter in de waterlaag bij de dubbele extractie dan in de waterlaag van
de enkele extractie. De Kow van p-nitrofenol is 89,1. Omdat de fractie van de dubbele extractie lager
zal liggen dan de enkele extractie, zal de k ow van de dubbele extractie lager liggen. Deze lagere K ow zal
dichtbij de Kow van p-nitrofenol liggen. De enkele extractie heeft een hogere K ow die meer van Kow van
p-nitrofenol dan bij de dubbele extractie.
, Materiaal & methode
Het experiment is uitgevoerd met behulp van het voorschrift “Enkele en dubbele vloeistof-vloeistof
extractie van p-nitrofenol” en het voorschrift “Calibratiecurve p-nitrofenol”, te vinden in de cursus
Labvaardigheden 4 op Moodle.
Materiaal Fabrikant Lotnummer
1-Octanol Arcos organics A0400743
4-Nitrofenol Arcos organics A0368402
Fosforzuur Arcos organics A0382511
Scheitrechter 100 mL Inholland Amsterdam
Bekerglas Inholland Amsterdam
Maatkolf 50 mL Inholland Amsterdam
Demiwater Inholland Amsterdam
K2H2PO4 Alfa Aesar Q18D028
Verwarmingsplaat
Doseerpipet Eppendorf
Standaarden berekenen:
0,2496 g p-nitrofenol per 250 mL.
0,0009984 g p-nitrofenol per mL.
S1 0,005 mL x 0,0009984 = 4,992 x 10 -6 g in 50 mL.
4,992 x 10-6 g = 9,984 x 10-5 g
50 mL 1000 mL
Afgerond bevat standaard 1 een concentratie van 0,0998 mg/L.
S2 0,05 mL x 0,0009984 = 4,992 x 10 -5 g in 50 mL.
4,992 x 10-5 g = 9,984 x 10-4 g
50 mL 1000 mL
Afgerond bevat standaard 2 een concentratie van 0,9984 mg/L.
S3 0,1 mL x 0,0009984 = 9,984 x 10-5 g in 50 mL
9,984 x 10-5 g = 1,9968 x 10-3 g
50 mL 1000 mL
Afgerond bevat standaard 2 een concentratie van 1,9968 mg/L.
S4 0,2 mL x 0,0009984 = 1,9968 x 10 -4 g in 50 mL.
1,9968 x 10-4 g = 3,9936 x 10-3 g
50 mL 1000 mL
Afgerond bevat standaard 4 een concentratie van 3,9936 mg/L.
S5 0,4 mL x 0,0009984 = 3,9936 x 10 -4 g in 50 mL.
3,9936 x 10-4 = 7,9872 x 10-3 g
50 mL 1000 mL
Afgerond bevat standaard 5 een concentratie van 7,9872 mg/L.
