Onderzoeksmethodes in de
biologie
Microscopie
Lichtmicroscoop
Voorbereiding preparaat:
1. Weefsel wordt gefixeerd.
2. In een aantal baden met alcohol van toenemende
sterkte, wordt water van de cel vervangen door
zuivere alcohol en daarna een stof waarin vetten
oplosbaar zijn (tolueen of xyleen).
3. Ontwaterde stukje weefsel wordt gelegd in oplossing van paraffine of tolueen.
4. Die wordt langzaam warmer en sterker, zodat cel water vervangen is door paraffine
en is nu ingebed.
5. Microtoom snijdt in plakjes (coupes).
6. Wordt gelegd op een objectglaasje, en paraffine wordt eruit opgelost.
7. Wordt weer gehydreerd door tolueen of xyleen en alcohol van afnemende sterkte.
8. Gekleurd in waterhoudende omgeving.
9. Weer dehydratatie.
10. Kan worden bekeken.
Elektronenmicroscoop
Beter te zien dan lichtmicroscoop, want versnelde elektronen hebben
een veel kleinere golflengte dan fotonen.
Transmissie-elektronenmicroscoop
Elektronen geschoten door dun preparaat, worden dan geprojecteerd
op fluorescerende plaat voor zichtbaarheid. Kunnen worden
vastgesteld op fotografische film.
Het gevormde beeld is donkerder in vergelijking met de dunnere
plaatsen van preparaat, want daar is meeste verstrooiing van
elektronen.
Rasterelektronenmicroscoop
Elektronenstraal geprojecteerd op gehele materiaal. Terugkaatsende
elektronen worden gedetecteerd en punt voor punt vastgelegd in een
beeld.
biologie
Microscopie
Lichtmicroscoop
Voorbereiding preparaat:
1. Weefsel wordt gefixeerd.
2. In een aantal baden met alcohol van toenemende
sterkte, wordt water van de cel vervangen door
zuivere alcohol en daarna een stof waarin vetten
oplosbaar zijn (tolueen of xyleen).
3. Ontwaterde stukje weefsel wordt gelegd in oplossing van paraffine of tolueen.
4. Die wordt langzaam warmer en sterker, zodat cel water vervangen is door paraffine
en is nu ingebed.
5. Microtoom snijdt in plakjes (coupes).
6. Wordt gelegd op een objectglaasje, en paraffine wordt eruit opgelost.
7. Wordt weer gehydreerd door tolueen of xyleen en alcohol van afnemende sterkte.
8. Gekleurd in waterhoudende omgeving.
9. Weer dehydratatie.
10. Kan worden bekeken.
Elektronenmicroscoop
Beter te zien dan lichtmicroscoop, want versnelde elektronen hebben
een veel kleinere golflengte dan fotonen.
Transmissie-elektronenmicroscoop
Elektronen geschoten door dun preparaat, worden dan geprojecteerd
op fluorescerende plaat voor zichtbaarheid. Kunnen worden
vastgesteld op fotografische film.
Het gevormde beeld is donkerder in vergelijking met de dunnere
plaatsen van preparaat, want daar is meeste verstrooiing van
elektronen.
Rasterelektronenmicroscoop
Elektronenstraal geprojecteerd op gehele materiaal. Terugkaatsende
elektronen worden gedetecteerd en punt voor punt vastgelegd in een
beeld.
