Flow cytometrie
Examenvragen :
• Je begrijpt het analyse- en sorteringsprincipe van een multilaser flowcytometer
• Je begrijpt en kan een overzicht geven van de belangrijkste toepassingen van
flowcytometrie in de diagnostiek en in biomedisch onderzoek
• Definieer de term flowcytometrie
• Beschrijf welk type biologisch staal het meest geschikt is voor een flowcytometriche analyse
• Beschrijf welke kenmerken van een cel of partikel door een flowcytometer kunnen gemeten
worden (= optische vingerafdruk)
• Identificeer de 3 componenten (= hoofdonderdelen) van een flowcytometer (fluidica, optica
en electronica) en beschrijf hun respectievelijke functies
• Verklaar hydrodynamische focusering
• Beschrijf hoe lichtverstrooiing beinvloed wordt door de kenmerken van een cel of partikel
• Beschrijf elastische en niet-elastische lichtverstrooiing
• Beschrijf het gebruik van excitatie- en emissiespectra
• Herken verschillende manieren om flowcytometrische data voor te stellen
Klinische casus:
• 14-jarige jongen
• 10 dagen koorts, bleek in het aangezicht, algemene zwakte, diffuse erythema
• Klinisch onderzoek: splenomegalie (vergroting van de mild)
• Bloedstaal nemen: hemoglobine is normaal, witte BC normaal verdeeld en aantal
Actieve, opgeblazen cellen -> maligniteit
Heb je te maken met maligne cellen? Beste behandeling?
Met flowcytometer inzoomen op elke cel individueel
Elke cel brengt eiwitten op membraan tot expressie -> CD nummers
CD19 -> merker voor B-cel
CD34 -> voorloper hematopoetische stamcellen
flow cytometer: dot plot
1
, elke dot = 1 cel
Resultaat: jongen heeft acute lymfoïde leukemie
Flow cytometry jargon
PARAMETER
Een fysisch of chemisch kenmerk van een cel
o Cytoplasmatische korrelgrootte of kern-DNA-gehalte
Een fysische eigenschap, gemeten door een sensor
o Lichtverstrooiing of fluorescentie
Een fysische eigenschap van een cel-geassocieerd reagens
o Intrinsiek
o Extrinsiek, afhankelijk van de vraag of de eigenschap al dan niet kan worden
gemeten met behulp van sondes
Excitatie Proces waarbij E geabsorbeerd wordt
Exctincit coëfficiënt Effeciëntie waarmee opstische E geabsorbeerd wordt, afhankelijk van
(e) golflengte
Emissie Proces waarbij optische E terug vrijgesteld wordt
Quantum opbrengst Efficiëntie waarmee E wordt vrijgesteld (0-1), meestal als fluorescentie
(Q) Onafhankelijk van golflengte
Stokes shift Verschil in E tussen excitatie max en emissie max
Spectrum Verdeling van excitatie en emissie golflengtes
Flow cytometrie
-> cellen meten in vloeistof flow
-> meten van lichtsignalen
metrie : detectie van lichtsignalen, opgewekt ten gevolge van de
snelle doorgang
cyto : van afzonderlijke cellen doorheen het centrum van een, tot
een microscopisch kleine spot gefocuseerde lichtstraal
flow : wat mogelijk is door de hydrodynamische focusering van de
celsuspensiestroom in een laminaire geleidingsvloeistofstroom
2
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur AVL2. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €4,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.