Resume
Samenvatting les 2 flow cytometrie.
- Établissement
- Universiteit Antwerpen (UA)
Samenvatting les 2 flow cytometrie. Samenvatting van de ppt, cursustekst en wat in de les is gezegd.
[Montrer plus]
Aperçu du contenu
Flow cytometrie : analytischetoepassingen, fluorescente sondes en
fluorescentiecompensatie
VRAGEN
Welke van onderstaande is de meest belangrijke voorwaarde/eigenschap voor/van flowcytometrie?
1. Mogelijk om mammalia cellen te meten
2. Maakt gebruik van laserlicht
3. Individuele cellen worden gemeten
4. Cellen kunnen gesorteerd worden
5. De resultaten kunnen geanalyseerd worden m.b.v.een pc
Antwoord: 3
Wat is de functie van de geleidingsvloeistof?
1. Verstrooiien van laserlicht
2. Celsuspensiestroom hydrodynamisch focuseren
3. Individuele cellen in suspensie houden
4. Afkoelen van suspensiestroom
5. Fluorescentie van cellen verbeteren
Antwoord: 2
Kan water een geleidingsvloeistof zijn?
1. Ja
2. Nee
Antwoord: 1, door verschil in concentratie tussen water en cellen kan osmose optreden -> niet bij
flowcytometrie -> water komt niet in contact met de cellen/celsuspensiestroom
Welke celeigenschap beïnvloedt voorwaartse lichtverstrooiing het meest?
1. Vorm
2. Verhouding kern/cytoplasma
3. Grootte
4. Aantal mitochondria
5. Optische heterogeniteit
Antwoord: 3
Welke eigenschap beïnvloedt zijwaartse lichtverstrooiing het meest?
1. Vorm
2. Verhouding kern/cytoplasma
3. Grootte
4. Aantal mitochondria
5. Optische heterogeniteit
Antwoord: 1,2,3,4 -> worden samengevat door 5, dus 5 is het antwoord
Een fluorochroom dat geëxiteerd wordt door blauw licht van 488nm zal…
1. Blauw fluoresceren
2. Groen fluoresceren
3. Fluoresceren met een golflengte groter dan 480nm
4. Fluoresceren met een golflengte kleiner dan 488nm
1
, Antwoord: 3 (groen zou ook kunnen maar je bent niet zeker kan ook oranje licht zijn), er wordt
minder E gebruikt om fluorochroom aan te stralen
Leerdoelen les 2
Beschrijf doel van cel- of partikelsortering
Beschrijf verschillende stappen van het sorteerproces
Beschrijf het gebruik van excitatie- en emissiespectra
Verklaar stokes shift
Verklaar wat compensatie is en waarom het noodzakelijk is in multiparameter analyses
Verklaar immuunfenotypering
Begrijp welke fluorochromen gebruikt kunnen worden in een flowcytometer (afhankelijk van
beschikbare lasers en filters/detectoren
1.2. flow cytometrisch sorteringsprincipe
Sorter: Vloeistofstraal wordt in druppels opgebroken
Analytisch instrument: analytische cel sorter
o Stream in quartz
o Laser ondervragingspunt bevindt zich in een
kwarts doorstroomcurve
Cell sorter
o Stream in air / jet
o Laser ondervragingspunt bevindt zich in de vrije
vloeistofstraal
Sorteerprincipe is gebasseerd op techniek voor inktjet afdrukken:
Gebaseerd op inkt stralen = jets: worden hoog frequent opgebroken in druppels die dan
elektrostatisch worden afgebogen naar het papier
-> toekomst: sorteren van cellen voor de generatie van 3D weefsels en/of organen
Vloeistofstraal ontstaat uit vloeistofstroom
Druppelvorming door:
Verstoring door instabiliteiten t.g.v. gravitatie, adhesie, oppervlaktespanningskrachten
Rayleigh theorie: pertubatie met λ = 4,5 x de diameter van uitgangsopening
heeft max. groeisnelheid
Pieco-elekrische element: trilling op vloeistofelement -> punt waarop eerste punt gevormd
wordt wordt vastgelegd in de flow cytometer
Pertubatie = doorgang maken voor
Opleggen van natuurlijke opbreek-frequentie m.b.v. ultrasone transducer
-> voor een d = 50 µm is dat bij λ = 225 µm (50 * 4,5)
-> frequentie = v/ λ waar vjet = 10 m/s -> frequentie = 44.4 kHz m.a.w. ~ 44000 druppels/s
Afbuigen door ladingspuls op te leggen en na afbuigingswachttijd (tijd tussen detectie van de cel en
haar verschijnen in afbrekende druppel)
-> tijdsduur ladingspuls = 1/frequentie = 23 µs
Afbuiging door ladingspuls op te leggen en straal doorheen hoogspanningsveld te sturen
2
Les avantages d'acheter des résumés chez Stuvia:
Qualité garantie par les avis des clients
Les clients de Stuvia ont évalués plus de 700 000 résumés. C'est comme ça que vous savez que vous achetez les meilleurs documents.
L’achat facile et rapide
Vous pouvez payer rapidement avec iDeal, carte de crédit ou Stuvia-crédit pour les résumés. Il n'y a pas d'adhésion nécessaire.
Focus sur l’essentiel
Vos camarades écrivent eux-mêmes les notes d’étude, c’est pourquoi les documents sont toujours fiables et à jour. Cela garantit que vous arrivez rapidement au coeur du matériel.
Foire aux questions
Qu'est-ce que j'obtiens en achetant ce document ?
Vous obtenez un PDF, disponible immédiatement après votre achat. Le document acheté est accessible à tout moment, n'importe où et indéfiniment via votre profil.
Garantie de remboursement : comment ça marche ?
Notre garantie de satisfaction garantit que vous trouverez toujours un document d'étude qui vous convient. Vous remplissez un formulaire et notre équipe du service client s'occupe du reste.
Auprès de qui est-ce que j'achète ce résumé ?
Stuvia est une place de marché. Alors, vous n'achetez donc pas ce document chez nous, mais auprès du vendeur AVL2. Stuvia facilite les paiements au vendeur.
Est-ce que j'aurai un abonnement?
Non, vous n'achetez ce résumé que pour €4,99. Vous n'êtes lié à rien après votre achat.
Peut-on faire confiance à Stuvia ?
4.6 étoiles sur Google & Trustpilot (+1000 avis)
48072 résumés ont été vendus ces 30 derniers jours
Fondée en 2010, la référence pour acheter des résumés depuis déjà 15 ans