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TP : structure de l'alanine et de l'arginine sur résine échangeuse d'ions
- Établissement
- Lyon I - Université Claude-Bernard
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Par: amelieneyrat • 4 année de cela
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1 sur 10TP 1 - Séparation de l’alanine et de l’arginine sur résine échangeuses d’ions
1- But
Le but de ce TP est de séparer deux acides aminés qui sont l’argine et l’alanine et ainsi de
déterminer leurs concentrations dans le mélange initial, connaissant la concentration totale
d’acides aminés dans cette solution.
Nous commencerons par séparer les deux acides aminés à l’aide d’une chromatographie par
échange d’ions, et nous vérifierons, à l’aide d’une réaction spécifique à un des acides aminés, que
cette séparation est bien effective (dans notre cas l’arginine). Ensuite, à l’aide d’un titrage
spectrophotométrique, nous déterminerons la concentration d’un des deux acides aminés (ici
alanine), ce qui nous permettra, après avoir vérifié que ce dosage n’a bien concerné que le
premier acide aminé, d’en déduire la concentration de l’autre.
2- Principe
Les acides aminés possèdent un groupe carboxyle (COOH) et un groupe amine (NH2). Les
groupes sont liés au carbone adjacent au groupe carboxyle dans le cas des acides alpha-aminés.
En milieu basique, le groupe carboxyle se comporte comme un acide faible et libère donc un
proton H+ :
En milieu acide, le groupe amine se comporte comme une base faible et capte donc un proton H+ :
Ainsi, ces propriétés acidobasiques permettent de déterminer différentes formes de l’acide aminé
en fonction du pH et du pKa :
De plus, si cette acide aminé possède un groupement acide ou basique sur sa chaine latérale on
obtiendra donc une forme supplémentaire qui peut être soit AA2+ soit AA2-
On peut donc dire qu’à chaque pH, on aura une forme différente prédominante. On peut donc
l’écrire sous la forme suivante :
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