fiche de cours

Légendes :
Année 2021-2022
Notion nouvelle cette année Révisions :
Notion tombée 1 fois au concours

Notion tombée 2 fois au concours

Notion récurrente au concours




Fiche de cours n°1
ACTUALISATION
Acides aminés : Partie 3

Plan

I. Marquage des extrémités

II. Clivage

III. Séquençage

, I. Marquage des extrémités / II. Clivage / III. Séquençage




Marquage des extrémités
Acide aminé N-terminal
• Marquage du groupement α-aminé
libre avec le DNFB
(DiNitroFluoroBenzène) ou le réactif
de Sanger (Il l’a utilisé pour
séquencer l’insuline)
o Réagit avec l’extrémité amine
qui est libre
o Formation d’une molécule
peu stable dont les liaisons
peptidiques entre tous les
résidus sont hydrolysées en
présence d’acide
o Sur l’illustration R1, R2, R3
sont les chaînes latérales des
résidus d’acides aminés qui forment cette protéine
o Tous les acides aminés sont libres
o Sauf celui en position N-terminal a créé une liaison covalente avec DNFB
• Libération du DNP-acide aminé (DinitroPhenyl) de couleur jaune
o Peut se détecter par absorbance
o Hydrophobe car groupement aromatique
§ Séparable des autres par chromatographie en phase inverse par
exemple
Acide aminé C-terminal
• On a une protéine constituée de
o L’extrémité N-terminal protonée
o L’enchaînement des résidus d’acides aminés
o L’extrémité C-terminal déprotonée
• Hydrazinnolise : L’hydrazine lyse l’amine de la liaison peptidique CO-NH
o La réaction donne à l’extrémité de chaque acide aminé CO-NHNH2
o Le seul qui n’est pas modifié c’est l’acide aminé en position C-terminal
• On met en évidence le seul acide aminé qui est inchangé, la technique est moins utilisée




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2021-2022