1 Inleiding
Orgaancultuur volledige organen of intacte orgaanfragmenten kweken.
Celcultuur cellen verwijderen van orgaan vooraleer men ze in een cultuur brengen.
In vitro cellen gekweekt buiten het lichaam.
In vivo gebruikt van volledig levend organisme.
Weefselkweek kloneren van planten onder steriele condities
Genetisch gemodificeerde planten: kenmerk wordt doorgegeven aan volgende
generatie.
Callus= ongedifferentieerde cellen.
1.1 Arabidopsis Thaliana/ zandraket
- Genoom volledig gekend
- Ontwikkeling en groei goed gekarakteriseerd
Floral dip= transformatie met agrobacterium tumefaciens om vreemd DNA in plantencel te brengen.
Gebruik: resistentie in plant te bouwen.
2 Hoe brengt men cellen in cultuur?
Dierlijke cellen
- weefsel → cellen
Primaire cultuur - hechten aan oppervlak
- delen en groeien
Hoe?
Explant cultuur Enzymatische dissociatie
2.1 Primaire cultuur
2.1.1 Explant cultuur (biopten)
Stukjes weefsel op glas/speciaal behandeld plastiek → onderdompelen in medium → individuele
cellen hechten en groeien.
2.1.2 Enzymatische dissociatie
Proces versnellen door toevoegen proteolytische enzymen (trypsine, collagenase, pronase).
Enzymen lossen matrix op die cellen bij elkaar houdt → suspensie van individuele cellen → in
cultuurflessen waar ze gaan delen en groeien.
AD Labcluster 3FBT: Celkweek 1
, 2.1.3 Cellijnen
ATCC= American Type Culture Collection
MCF-7= borstkankercellijn
Uitwisseling tussen laboratoria → problemen met contaminatie, verwisseling en vermenging.
combinatie met EDTA →
Proteolytische enzymen breken EWbindingen → cellen
loskomen van groeiopp
Serum stoppen van proteolytische reactie
celschraper: cellen fysisch verwijderen
Celsuspensie
van groeiopp.
- passage: cellen splitsen
Verdunde celsuspensie - passage nummer
- beperk voor sommige cellijnen
Confluent= wanner cellen gegroeid zijn en het volledige beschikbare cultuuroppervlak bedekt is.
EDTA:
- Enkel gebruikt om cellen los te maken
- Minder destructief dan trypsine (breekt EWbindingen af die cellen met cultuuropp. verbindt)
- Bind calcium (nodig bij binding)
2.3 Groeipatroon
Lag – log – plateau – veroudering/celdood
Rust/Lagfase= opstart, duur afh. van celtype, dichtheid, medium en
voorbehandeling.
Logfase= hoogste metabole activiteit
Plateau fase= stationaire fase= confluentie
Cellen best splitsen aan het einde van de logfase.
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper amberdams. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €6,49. Je zit daarna nergens aan vast.