100% tevredenheidsgarantie Direct beschikbaar na betaling Zowel online als in PDF Je zit nergens aan vast
logo-home
samenvatting hoofdstuk 2 toolbox biotechnologie €3,99   In winkelwagen

Samenvatting

samenvatting hoofdstuk 2 toolbox biotechnologie

 2 keer bekeken  0 keer verkocht

het 2e hoofdstuk van het gedeelte toolbox samengevat

Voorbeeld 1 van de 2  pagina's

  • 24 november 2021
  • 2
  • 2020/2021
  • Samenvatting
Alle documenten voor dit vak (10)
avatar-seller
fraukevanmeulder
Toolbox biotechnologie: Hoofdstuk 2
Gelelektroforese
Horizontale elektroforese
 DNA scheiding
 Gel = agarose
 Nancy, Redsafe (vroeger ethidiumbromide) of Diamond bindt specifiek aan DNA voor visualisatie

Verticale elektroforese
 Eiwitscheiding
 Gel = polyacrylamide
 Coomassie blauw bindt aspecifiek aan EW

Stappenplan: methode en principe
 Aanmaak buffer
 Aanmaak agarose gel
 Laden gel
 Elektroforese
 DNA visualisatie

Aanmaak buffer
 TBE of TAE = heeft 2-voudige beschermende functie
 Bestaat uit:
 Tris (base)
Zorgt ervoor dat pH behouden blijft en beschermd DNA tegen hydrolyse
 Boorzuur of Acetaat (zuur)
 EDTA (ethyleendiaminetetra-azijnzuur) → blokkeert werking van DNase
 Deze buffer word gebruikt voor de aanmaak van de agarose gel

Aanmaak agarose
 Agarose = extract van zeewier
 moleculaire zeef = kleinere molecule DNA zullen sneller doorheen gel bewegen dan grotere
 1g agar (poeder) per 100 ml TBE (buffer) = 1% gel
 Agarosepercentages kunnen variëren van 0.3% agarose tot 4%
 Hoe kleiner het agarosepercentage hoe groter de te scheiden DNA grootte
 Poeder + buffer mengen en opwarmen tot kookpunt, daarna fluorescente dye toevoegen (Nancy)
 Handwarme oplossing uitgieten in mal + slotkam toevoegen die na uitharden verwijdert word

Laden gel
 Gel overbrengen in elektroforese toestel en aanvullen met TBE buffer tot gel volledig onder staat
 DNA stalen pipetteren in de slotjes = laden van de gel
 Laadbuffer/ loading dye word toegevoegd aan het DNA voor 2 redenen:
 Bevat kleurstof: om pipetteerproces en elektroforese makkelijker visueel te volgen
 bevat glycerol: maakt DNA oplossing zwaarder zodat deze makkelijk uitzakt in de slotjes
(densiteit van DNA oplossing wordt verhoogd)

Elektroforese
 40 tot 60 minuten op 70 – 100V
 Elektrisch veld ontstaat: - geladen DNA moleculen kunnen migreren richting positieve electrode
 DNA is negatief geladen en migreert van de kathode (-) naar de anode (+)
 Elektrocutiegevaar
 De afstand van migratie gebeurt in functie van de grootte van de moleculen
 Steeds visueel volgen
 Controle of elektroforese gestart is = vorming van bellen

Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:

√  	Verzekerd van kwaliteit door reviews

√ Verzekerd van kwaliteit door reviews

Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!

Snel en makkelijk kopen

Snel en makkelijk kopen

Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.

Focus op de essentie

Focus op de essentie

Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!

Veelgestelde vragen

Wat krijg ik als ik dit document koop?

Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.

Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?

Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.

Van wie koop ik deze samenvatting?

Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper fraukevanmeulder. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.

Zit ik meteen vast aan een abonnement?

Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €3,99. Je zit daarna nergens aan vast.

Is Stuvia te vertrouwen?

4,6 sterren op Google & Trustpilot (+1000 reviews)

Afgelopen 30 dagen zijn er 82191 samenvattingen verkocht

Opgericht in 2010, al 14 jaar dé plek om samenvattingen te kopen

Start met verkopen
€3,99
  • (0)
  Kopen