,Week 7: UV/VIS-Spectrofotometrie
Principe
Elektromagnetische straling:
Atomen en moleculen kunnen straling opnemen (absorptie) of uitzenden (emissie)
Elektromagnetische straling kan worden voorgesteld als een elektrisch en een magnetisch
veld die zich verspreidt doorheen de ruimte. => vacuüm= snelheid van het licht. λ*f=c; c=
30 000 000 m/s
Het elektromagnetisch spectrum is de rangschikking van golven met oplopende golflengte
en afnemende frequentie.
Energie ve foton: E= h*f; h= 6,626 * 10-34 J*s
Absorptie van licht:
Het proces waarbij atomen of moleculen in een transparant medium selectief bepaalde
frequenties van het elektromagnetische spectrum gaan verminderen.
Bezit elk deeltje heeft een bepaalde energetische grondtoestand.
Wanneer een foton zo'n deeltje nadert, kan het geabsorbeerd worden op voorwaarde dat de
energie van het foton exact overeenkomt met het energieverschil tussen de grondtoestand
van het deeltje en één van zijn hogere energietoestanden. Het deeltje bevindt zich dan in
de geëxciteerde toestand: M + h*f => M*
Na een zéér korte periode zal dit geëxciteerde deeltje relaxeren naar zijn originele toestand
waarbij de overtollige energie wordt overgedragen aan deeltjes met: M* => M + warmte.
Wanneer in oplossingen de absorptie van licht wordt gemeten of gekwantificeerd, spreken
we over spectrofotometrie.
Relaxatie kan zich ook voordoen als emissie van straling, al dan niet fluorescent of
fosforescent; ook deze straling kan gemeten en gekwantificeerd worden.
2
, Absorptie en emissie
Karakteristiek voor een welbepaalde stof
Op dit principe berust de kwalitatieve analyse. Hier ga je zien welke stof het licht gaat
absorberen. Daarenboven geldt dat de mate waarin straling geabsorbeerd (of geëmitteerd)
wordt afhankelijk is van het aantal deeltjes dat zich in aangeslagen toestand bevindt. Hierop
berust de kwantitatieve analyse. Hier ga je de extinctie meten.
Om de absorptie te bepalen, meet je eerst de intensiteit van het ongehinderde, invallende
licht. Dit licht gaat door de monsteroplossing. Dan meet je de intensiteit van het niet-
geabsorbeerde licht. De verhouding tussen deze twee noemen we de transmissie: T= I/I0
We werken meestal met Extinctie(E)= -log T. Het verband tussen E en conc. is wel rechtlijnig.
Deze hebben beide geen eenheid.
Emissie daarentegen wordt gemeten als stralingsintensiteit. In principe heeft intensiteit de
eenheid W/m2; in de praktijk wordt de intensiteit door het meetinstrument vaak omgezet tot
een eenvoudig, dimensieloos signaal.
Wet van Lambert-Beer
Bij zeer lage concentraties geldt: E= ɛ*l*C
Bovenstaande vergelijking toont dat de molaire extinctiecoëfficiënt ɛ kan worden bepaald
met behulp van een kalibratielijn. Hiervoor kunnen we een externe of interne
standaardmethode en standaardadditie methode gebruiken.
De extinctiecoëfficiënt is een constante waarde die kan worden opgezocht in de literatuur.
Wanneer de eenheid van de extinctiecoëfficiënt niet uitgedrukt wordt in L/(mol*cm), maar in
mL/(g*cm) of in mL/(ppm*cm), spreekt men over de specifieke extinctiecoëfficiënt. In de
farmaceutische wereld wordt ook gebruik gemaakt van de extinctie bij 1% en 1 cm. Dit is de
extinctie van een oplossing met een concentratie van 1 mv% bij een weglengte van 1 cm.
2
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper arnevanhoudt. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €3,99. Je zit daarna nergens aan vast.