Hoofdstuk 13: DNA-replicatie in vitro en
sequentie-analyse
• Polymerase chain reaction: PCR => exponentiële amplificatie
⤷ Met thermocycler
→ Template, primers (langs beide uiteinden 1)
⤷ bepaalt wat te vermenigvuldigen is
→ TaqI-polymerase (< thermofiele bacteriën)
→ Denaturatie = scheiden v/d strengen door temperatuur (95°C)
→ Primers annealing = primers basenparen met template (45°C – 60°C)
→ Extensie: DNA-synthese vanaf primer (72°C)
→ Herhaal 30x
→ Hypervariabele sequenties! → VNTR die verschillende # hebben van individu tot individu
⤷ ”microsatellieten”
= Short tandem repeats (STR)
= Simple sequence repeat (SSR)
• Gevoeligheid: contaminatie => vals positief
• Dideoximethode van Sanger: sequentie-analyse
→ Basenparen v/e primer op enkelstrengig DNA
→ 4 verschillende proefbuizen met verschillende dNTP’s en ook met ddNTP
(=ketenterminerend)
⤷ Geen OH’-groep aan de 3’-kant
→ Allemaal verschillende lengtes, maar we weten met welke ddNTP het eindigt => scheiding
op lengte
→ Fluorescentiemarkers voor de 4 ddNTP’s => meer 1 buisje nodig => basendetectie
• Next generation sequencing: methodes die grote # sequenties tegelijk doen
• Nanopore sequencing: DNA door nanoporie en basen o.b.v. elektriciteitsverschillen bepaald
• NIPT (=niet-invasieve, prenatale test): analyse op DNA foetus
Voordelen van het kopen van samenvattingen bij Stuvia op een rij:
√ Verzekerd van kwaliteit door reviews
Stuvia-klanten hebben meer dan 700.000 samenvattingen beoordeeld. Zo weet je zeker dat je de beste documenten koopt!
Snel en makkelijk kopen
Je betaalt supersnel en eenmalig met iDeal, Bancontact of creditcard voor de samenvatting. Zonder lidmaatschap.
Focus op de essentie
Samenvattingen worden geschreven voor en door anderen. Daarom zijn de samenvattingen altijd betrouwbaar en actueel. Zo kom je snel tot de kern!
Veelgestelde vragen
Wat krijg ik als ik dit document koop?
Je krijgt een PDF, die direct beschikbaar is na je aankoop. Het gekochte document is altijd, overal en oneindig toegankelijk via je profiel.
Tevredenheidsgarantie: hoe werkt dat?
Onze tevredenheidsgarantie zorgt ervoor dat je altijd een studiedocument vindt dat goed bij je past. Je vult een formulier in en onze klantenservice regelt de rest.
Van wie koop ik deze samenvatting?
Stuvia is een marktplaats, je koop dit document dus niet van ons, maar van verkoper ameliakirkov. Stuvia faciliteert de betaling aan de verkoper.
Zit ik meteen vast aan een abonnement?
Nee, je koopt alleen deze samenvatting voor €5,49. Je zit daarna nergens aan vast.